MAPK信号通路在抑郁模型大鼠中的作用

发布时间：2018-06-30 21:39

本文选题：抑郁症 + MKP-1　；参考：《新乡医学院》2017年硕士论文

【摘要】：背景抑郁症是一种慢性、容易复发的常见精神疾病,发病机制较为复杂,目前没有一种假说能够全面的解释病因,治疗学也受到阻碍。随着抑郁症分子学研究的发展,近年来细胞信号通路的研究受到了人们的广泛关注。MAPK是一条重要的细胞信号通路,参与了细胞增殖、分化、凋亡等一系列的细胞进程,MKP-1是MAPK的磷酸酶,调节着其活性,参与了抑郁症的病理生理过程。本研究以慢性不可预见性刺激(chronic unpredictable mild stress,CUS)大鼠模型为研究对象,以氟西汀为干预药物,探讨MKP-1及MAPK通路在抑郁症中的作用。目的1.观察慢性不可预见性轻度应激对SD大鼠行为学的影响。2.分析比较各组大鼠海马中MKP-1、p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38及p38的蛋白表达量。方法1.SD大鼠的分组及CUS造模SPF级SD大鼠50只,依据首次旷场试验淘汰10只离群大鼠,剩余大鼠采用随机数字表法分为正常组,CUS组,CUS+生理盐水组及CUS+氟西汀组,每组10只。CUS组,CUS+生理盐水组及CUS+氟西汀组接受为期8周的CUS造模。10种刺激每天1种,随机排列组合,1周内不出现相同刺激,使大鼠不能预测到下一个刺激。2.药物干预CUS+氟西汀组大鼠给予4周的氟西汀干预,按每天10mg/kg给大鼠灌胃;CUS+生理盐水组大鼠给予4周的生理盐水灌胃,相同体质量的大鼠给予与氟西汀相同体积的生理盐水。灌胃从实验第5周到第8周。3.行为学评估采用体质量增加量、旷场试验、蔗糖偏好试验及强迫游泳等四种方法对SD大鼠CUS造模前、造模后及药物干预后进行行为学评估。4.MKP-1、p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38及p38等蛋白的检测采用免疫印迹法(Western blotting)对大鼠海马内MKP-1、p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38及p38等蛋白进行检测。5.统计方法采用SPSS 19.0统计软件处理数据,数据以均数±标准差(x±s)表示,多组计量资料比较时采用单因素方差分析(one-way ANOVA)进行分析,组间两两比较方差齐时采用LSD法,方差不齐时采用Tamhane法。以P0.05为差异有统计学意义。结果1.行为学评估各组大鼠造模前体质量、旷场试验中(水平运动距离,直立次数及穿格次数)、蔗糖偏好指数及强迫游泳不动时间组间相互比较,差异均无统计学意义(P0.05)。经过4周的造模,CUS组、CUS+生理盐水组及CUS+氟西汀组与正常组两两比较,体质量增加减少,水平运动距离减少,直立次数减少,穿格次数减少、蔗糖偏好指数下降、强迫游泳不动时间增加,差异均有统计学意义(P0.05),而造模后的三组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。经过4周生理盐水灌胃后的大鼠与CUS组比较,体质量增加量、旷场试验(水平运动距离、直立次数及穿格次数)、蔗糖偏好指数及强迫游泳不动时间差异均无统计学意义(P0.05);与正常组比较,体质量增加量减少,水平运动距离减少,直立次数减少,穿格次数减少,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,差异均有统计学意义(P0.05)。经过4周氟西汀干预后大鼠与CUS组比较,体质量增加量上升,水平运动距离增加,直立次数增加,穿格次数增多,蔗糖偏好指数上升,强迫游泳不动时间减少,差异均有统计学意义(P0.05);与正常组比较,体质量增加、旷场试验(水平运动距离、直立次数及穿格次数)、蔗糖偏好指数及强迫游泳不动时间差异均无统计学意义(P0.05)。2.免疫印迹结果(1)MKP-1蛋白表达:与正常组相比,CUS组大鼠MKP-1表达显著升高,差异有统计学意义(P0.05),经过生理盐水干预后的大鼠,与CUS组大鼠相比,MKP-1表达无显著差异(P0.05),而用氟西汀干预后的大鼠较CUS组大鼠MKP-1表达有明显下调,差异有统计学意义(P0.05),与正常组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(2)p-ERK/ERK蛋白表达水平:与正常组相比,CUS组大鼠p-ERK/ERK表达显著下调,差异有统计学意义(P0.05),经过生理盐水干预后的大鼠,与CUS组大鼠相比,p-ERK/ERK表达无显著变化(P0.05),而用氟西汀干预后的大鼠与CUS组大鼠比较,p-ERK/ERK表达有明显上调,差异有统计学意义(P0.05),与正常组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(3)p-JNK/JNK蛋白表达:正常组,CUS组,CUS+生理盐水组及CUS+氟西汀组p-JNK、JNK及p-JNK/JNK的蛋白表达量无显著变化,无统计学意义(P0.05)。(4)p-p38/p38蛋白表达:正常组,CUS组,CUS+生理盐水组及CUS+氟西汀组p-p38、p38及p-p38/p38的蛋白表达量无显著变化,无统计学意义(P0.05)。结论1.MKP-1可能是抑郁症发病的一个重要基因,也可能是抑郁症治疗的一个潜在的治疗靶点。2.ERK通路可能是MAPK信号通路中与抑郁症病理机制关系最密切的一条。3.MKP-1-ERK可能是氟西汀治疗抑郁症的作用点。
[Abstract]:In order to study the effect of MKP - 1 and MAPK pathway on the behavior of SD rats , the effect of MKP - 1 and MAPK pathway on the behavior of SD rats was studied . Results 1 . Compared with the normal group , the body mass increased , the horizontal movement distance decreased , the number of upright times decreased , the number of cases decreased , the sucrose preference index decreased , the forced swimming not moving time increased , the difference was statistically significant ( P0.05 ) . After 4 weeks of fluoxetine intervention , the body mass increased , the sucrose preference index decreased , the forced swimming not moving time increased , the number of penetrating cases increased , the sucrose preference index increased , the forced swimming not moving time decreased , Compared with the normal group , there was no significant difference in the expression of p - ERK / ERK ( P0.05 ) . Compared with the normal group , there was no significant difference in the expression of p - ERK / ERK ( P0.05 ) . ( 4 ) The expression of p - p38 , p38 and p - p38 / p38 in P - p38 , p38 and p - p38 / p38 in the normal group , the CUS group , the CUS + physiological saline group and the CUS + fluoxetine group was not statistically significant ( P0.05 ) .
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R749.4;R-332

【参考文献】