脂质代谢相关基因多态与汉族阿尔兹海默病的关系及可能的机制

发布时间：2019-03-28 06:17

【摘要】：痴呆是一种后天性、持续性的智能障碍。患者在意识清楚的情况下,出现以记忆为主的各种认知功能的减退及情感人格的变化,是一种足以妨碍患者社会生活和日常生活能力的综合征。阿尔兹海默病(AD)是痴呆最常见的类型,大约占到痴呆总数的70%,给患者及其家人乃至整个社会造成了沉重的经济及情感负担。AD最重要的易感因素是年龄和家族史。长期以来,人们发现AD具有遗传性,并且其遗传度可以达到58-79%。正是这种公认的遗传度,促使研究者们多年来为了寻找AD的易感基因而不懈的努力探索。在最近两项大规模的全基因组关联分析(GWAS)结果发表之前,载脂蛋白E (APOE)基因是人们唯一公认与晚发型AD(LOAD)相关的基因。由于apoE是中枢神经系统最重要的载脂蛋白,在胆固醇动员、重新分布及排泄等代谢过程中均具有重要作用,因此人们推测胆固醇代谢紊乱可能参与AD的发病过程。而最近的两项大型的GWAS研究进一步证实了这种结论的可靠性,因为这两项研究发现的与AD相关的基因,几乎都在脂质代谢中具有重要作用。因此,本文拟研究这些热点基因与中国汉族人群SAD的关系,并探讨其可能的作用机制。第一部分脂质代谢相关基因多态在中国汉族人群与阿尔兹海默病的关联分析目的：研究CLU、CR1、PICALM和ABCA1这4个基因的6个SNPs与中国汉族人群SAD的相关性,并探讨其与年龄、性别、ApoE等位基因ε4等已知的SAD风险因素之间是否存在交互作用。方法：采用病例-对照的研究方法收集临床资料及外周血标本,常规方法抽提DNA,应用聚合酶链式反应及限制性内切酶片段长度多态性测定(PCR-RFLP)或PCR产物直接测序的方法进行上述几个基因多态的基因型分型,采用Pearson卡方检验对两组间各基因型及等位基因频率进行统计学分析,并应用二元逻辑回归模型分析基因多态性与AD患病风险的关系。结果：本研究共入组研究对象1065人,其中AD组474人,对照组591人。AD组和对照组间年龄、性别均无统计学差异(p0.05)。AD组MMSE评分显著低于对照组,两组之间存在统计学差异(p0.0001)。两组之间在APOE s4等位基因携带者及ε4ε4基因型上亦存在显著统计学差异(p0.0001)。分别对AD组和对照组CLU、CR1、PICALM、ABCA1基因型频率进行H-W遗传平衡检验,经检验各组均符合H-W平衡,说明研究对象具有较好的群体代表性。本研究发现,ABCA1的R219K三种基因型在AD和对照组间分布存在明显差异,两者之间存在统计学意义(RK:P=0.015, OR1.536,95%CI1.087-1.707).此外,按年龄、性别和ApoE等位基因ε4携带情况进行分层分析后,这种差异在晚发组和APOE ε4ε4非携带组更加明显(LOAD:P=0.005, OR1.921,95%CI1.213-3.041; APOEε4ε4非携带组：P=0.013, OR1.576,95%CI1.103-2.252).未发现V825I等位基因和基因型频率在AD组和对照组间分布存在差异。(本部分内容已发表于美国老年心理学杂志,详见已发表文章)。没有发现CLU, CR1和PICALM的4个SNPs的等位基因和基因型频率分布在AD和对照组间存在统计学差异(rsl1136000:P=0.711; rs9331888:P=0.210; rs6656401:P=0.482; rs3851179:P=0.890)。此外,分别按照年龄、性别和ApoE等位基因ε4携带情况进行分层分析后,此4个SNPs的等位基因和基因型频率在AD和对照各亚组间仍无统计学差异。(本部分内容已发表于阿尔兹海默病杂志,详见已发表文章)。结论：ABCA1的R219K增加中国汉族人群SAD的发病风险。CLU, CR1和PICALM的4个SNPs可能与中国汉族人群SAD发病风险无关。第二部分ABCA1基因多态影响AD发病风险的可能机制目的：研究AD组和对照组之间ABCA1外周血mRNA表达水平和血脂水平的差异,以及R219K不同基因型对两组之间外周血mRNA表达水平和血脂水平的影响,从而探讨ABCA1R219K基因型增加AD发病风险的可能的机制。方法：采用病例-对照的研究方法,收集临床资料和外周血标本。常规方法抽提RNA,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)的方法检测ABCA1外周血mRNA的表达。并收集部分病例的血脂信息,研究ABCA1不同基因型对外周血血脂水平的影响。采用独立样本T检验进行mRNA表达水平及血脂水平分析。结果：本研究共入组研究对象67例,其中AD组35例,对照组32例。 ABCAlmRNA在AD组的表达水平明显低于对照组。其中,AD组2-ΔΔCt均值为0.029526,而对照组2-△△Ct均值为0.22345,是AD组的近十倍。两组之间差异存在统计学意义(P=0.022)。此外,按照R219K不同基因型进行分析后发现,R等位基因对nRNA表达水平影响显著,AD组R等位基因携带者mRNA均值为0.034359,而对照组R等位基因携带者为0.295301,是AD组的近十倍。两者之间存在统计学差异(P=0.039)。本研究未发现AD组和对照组间外周血各项血脂水平存在统计学差异。但按照R219K不同基因型进行分析后发现,RK基因型对两组之间甘油三酯(TG)影响显著,两者之间存在统计学差异(P=0.003)。此外,AD组高密度脂蛋白(HDL)亦明显高于对照组(AD组：1.46mmol/1;对照组：1.10mmol/1),但其差异尚未达到统计学标准(P=0.071)。结论：ABCA1R219K基因型可能通过降低ABCA1的表达,进一步造成脂质代谢紊乱,从而增加AD的发病风险。
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【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R749.16

【共引文献】