高效液相色谱—荧光法同时测定重性抑郁障碍患者血清酪氨酸、5-羟色胺和色氨酸

发布时间：2020-05-03 14:51

【摘要】：目的：1.建立一种简单、快速并能同时测定血清中酪氨酸(Tyr)、5-羟色胺(5-HT)和色氨酸(Trp)的高效液相色谱—荧光检测法(HPLC-FLD)。 2.初步探讨血清酪氨酸(Tyr)、5-羟色胺(5-HT)和色氨酸(Trp)含量测定在重性抑郁障碍(MDD)患者中的临床价值。方法：1.血清标本与等量5%(V/V)高氯酸溶液混合处理去蛋白后离心取上清液20μL直接进样分析。用Atlantis C18 column (4.6×150mm,i.d.5μm)分离；流动相为0.1 mol/L KH2P04:甲醇(85：15,V/V)；流速1.0mL/min;荧光检测波长：0-4min激发光波长228nm,发射光波长为306mn;4-7.5min激发光波长278nm,发射光波长为338nm;7.5min后激发光波长285nm,发射光波长为353nm。室温下12min内完成分析测定。Tyr.5-HT和Trp均采用峰保留值比较法和叠加法进行定性分析,用外标法测定峰面积进行定量分析。通过对线性范围和检测限、精密度、回收率和干扰试验的考察,对该方法进行方法学评价。 2.测定健康成人(n=110例)和MDD患者(n=60例)血清Tyr、5-HT和Trp含量。探讨MDD患者血清Tyr、5-HT和Trp含量含量变化临床意义。结果：1.血清和标准品样本的Tyr、5-HT和Trp峰均分离良好,保留时间分别约为3min、5min和9min。Tyr的线性范围为0.55-275μmol/L,最低检出浓度为0.014μmol/L,回收率为98.0%-103.3%；5-HT的线性范围为0.094-47.03μmol/L,最低检出浓度为0.024μmol/L,回收率为96.3%-103.1%；Trp的线性范围为0.049-49μmol/L,最低检测浓度为0.0049μmol/L,回收率为93.3%-103.5%。Tyr、5-HT和Trp的日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%。苯丙氨酸(Phe)、犬尿喹啉酸(Kyna)、犬尿氨酸(Kyn)和肌酐(Cre)等物质对该法均无干扰。 2.110例健康成人血清Tyr含量为(63.68±2.23)μmol/L,血清5-HT含量为(1.15±0.04)gmol/L,血清Trp含量为(42.46±1.17)μmol/L, 5-HT/Trp(×10-3)比值为(26.20±7.21)。与正常对照组比较,MDD患者组血清Tyr、5-HT和Trp含量显著降低(P0.01)。Tyr诊断MDD的敏感性和特异性分别为：85.0%和100.0%；5-HT/Trp比值诊断MDD的敏感性和特异性分均为100%。结论：1.本文在国内外首次建立HPLC-FLD法同时测定血清Tyr、5-HT和Trp,方法简单、快速、灵敏、特异、准确,适宜于临床和科研工作。 2.血清Tyr、5-HT和Trp对MDD的临床辅助诊断有一定的临床价值。
【图文】：

曲线,曲线,敏感度,比值

3.3.2.3Tyr、5一HT和Trp对MDD诊断的效能评价本文对5一HT/Trp比值和Tyr含量诊断MDD的所有可能的界值作ROC曲线，如图3一7。结果显示5一HT/Trp比值诊断MDD的AUC为 1.0，以5一HT/Trp比值 ((16.63x10一3)作为界值的敏感度为100%，特异度为100%。以Tyr浓度(60.53 pmol/L作为临界值，诊断MDD的AUC为0.885，，敏感度为85.0%，特异度为100%。说明Tyr和5一HT/Trp这两个指标对MDD具有较好的诊断效能。度城接—5一HTITYr—Tyr0刀 020.40.60.日 1.01·特异性图3一 7Tyr和5一HT汀中诊断MDD的Roc曲线Fig.3一 7ROCcurveofTyrands一HT/Trp
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：O657.72;R749.4

【参考文献】