幽门螺杆菌外膜囊泡诱导AD样tau病变

发布时间：2020-05-03 16:31

【摘要】：阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)是最常见的神经退行性病变,以进行性记忆和认知功能障碍为主要临床症状。AD的特征性病理变化之一是细胞内神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)的形成,NFT的主要成分是异常高度磷酸化的微管相关蛋白tau。AD的病因尚不明确,临床上99%的AD为散发性,提示AD的发生和环境因素密切相关。幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是革兰氏阴性螺旋杆菌,在人群中感染率高,是胃炎和胃溃疡的主要致病菌。近年临床流行病学调查表明幽门螺杆菌感染与AD相关;我们前期研究也表明幽门螺杆菌滤液可诱导体内外AD样tau蛋白过度磷酸化,促进AD样病变的形成。然而,其致病途径和机制尚未阐明。在人群中幽门螺杆菌感染主要为经口感染,定植于胃部,我们猜测幽门螺杆菌长期胃内定植可能通过肠脑轴等途径导致AD样病变。同时我们也在探究幽门螺杆菌滤液中的何种成分参与诱导AD样病变。一方面,幽门螺杆菌的主要致病因子是细胞毒素相关蛋白(cytotoxin associated protein,CagA)和尿素酶(urease,Ure)等,在实验中我们通过免疫蛋白印迹检测到幽门螺杆菌裂解液和滤液中均含有Ure,且幽门螺杆菌裂解液中蛋白含量更高,由此猜测幽门螺杆菌裂解液也能和滤液一样诱导AD样tau蛋白病变。另一方面,幽门螺杆菌能分泌外膜囊泡(Outer Membrane Vesicles,OMVs),OMVs中包含大量的细菌成分并参与传递致病因子诱导疾病,因此我们也探讨了幽门螺杆菌OMVs是否参与诱导AD样tau病变。【目的】1.研究幽门螺杆菌长期胃内定植对大鼠学习记忆以及tau蛋白磷酸化修饰的影响。2.研究幽门螺杆菌裂解液对tau蛋白磷酸化的影响。3.研究从幽门螺杆菌滤液中分离出的OMVs对tau蛋白磷酸化修饰的影响。【方法】1.筛选健康的、体重没有明显差异的雌性SD大鼠进行幽门螺杆菌菌液灌胃构建幽门螺杆菌长期胃内定植的动物模型。通过PCR和革兰氏染色的方法检测细菌的胃内定植情况。采用旷场试验和水迷宫实验检测学习记忆。采用免疫印迹的方法检测脑组织中tau蛋白不同位点磷酸化的水平。2.筛选健康的、体重没有明显差异的雄性SD大鼠进行腹腔注射幽门螺杆菌裂解液和滤液,提取脑组织蛋白采用免疫印迹的方法检测脑组织中tau蛋白不同位点磷酸化的水平。3.从幽门螺杆菌滤液中分离纯化OMVs,筛选健康的、体重没有明显差异的雌性SD大鼠,尾静脉注射纯化的OMVs,提取脑组织蛋白检测tau相关位点的磷酸化水平。【结果】1.幽门螺杆菌菌液灌胃组(H.pylori组)的胃组织匀浆可检测出16S-rRNA和caga等幽门螺杆菌相关的基因,而对照组PBS灌胃组(Con组)未检出。胃黏膜涂片革兰氏染色,仅H.pylori组镜下可检测出红色,短杆状菌体。结果提示SD大鼠胃内幽门螺杆菌定植模型构建成功。2.Con组和H.pylori组大鼠进行旷场试验及水迷宫实验。旷场试验中,两组老鼠在运动能力方面无差异。水迷宫实验中,在学习阶段两组的潜伏期无显著差异,在检测阶段,两组的穿越平台次数和潜伏期无明显差异。3.Con组和H.pylori组海马组织和皮质组织匀浆检测tau相关位点磷酸化水平变化。免疫蛋白印迹实验中,海马组织和皮质组织匀浆中H.pylori组tau在不同磷酸化位点如Thr205、Thr231、Ser396和Ser404的磷酸化水平较Con组无显著差异。4.大鼠腹腔注射幽门螺杆菌裂解液或滤液,提取海马组织蛋白,检测tau蛋白相关位点的磷酸化水平,发现H.pylori裂解液组(H.pylori Lysate组)相对于Con组无明显变化,H.pylori滤液组(H.pylori Filtrate组)相对于Con组显著增加(P0.05)。5.幽门螺杆菌和大肠杆菌滤液大量含有细菌分泌的OMVs。尾静脉注射OMVs后,幽门螺杆菌组SD大鼠海马组织tau蛋白相较于Con组在Ser396和Ser404位点检测到出现磷酸化修饰增加(P0.05),大肠杆菌组没有出现显著改变。【结论】1.SD大鼠胃内幽门螺杆长期定植动物模型未能出现脑内病变,不适于研究幽门螺杆菌感染与脑部疾病和之间的关系。2.UreB不是腹腔注射幽门螺杆菌滤液诱导tau样病变的主要致病因子。3.幽门螺杆菌OMVs诱导脑内tau病变。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R749.16

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 韩佰南;;幽门螺杆菌根除治疗对幽门螺杆菌阳性的功能性消化不良患者的质量效果[J];中国妇幼健康研究;2016年S2期

2 宁红建;;雷贝拉唑三联疗法治疗幽门螺杆菌阳性消化性溃疡临床疗效[J];中国实用医药;2016年33期

3 曲智威;于明俊;刘春雷;;半夏泻心汤治疗幽门螺杆菌阳性相关性胃炎98例临床研究[J];北华大学学报(自然科学版);2017年03期

4 古豫;米玛央吉;;三联疗法治疗幽门螺杆菌阳性消化性溃疡的效果观察[J];临床合理用药杂志;2017年11期

5 王文莉;;幽门螺杆菌阳性消化性溃疡的治疗及护理效果[J];基层医学论坛;2017年27期

6 王飞;;雷贝拉唑治疗幽门螺杆菌阳性消化性溃疡的效果[J];世界最新医学信息文摘;2016年74期

7 赵安平;刘艳;朱艳丽;;幽门螺杆菌阳性消化性溃疡的治疗和护理[J];解放军预防医学杂志;2016年S2期

8 王社灯;;瑞倍三联疗法治疗幽门螺杆菌阳性十二指肠溃疡的临床观察[J];长江大学学报(自科版);2014年36期

9 黄翠华;;四联疗法治疗幽门螺杆菌阳性十二指肠球部溃疡效果探讨[J];中外医疗;2015年07期

10 王春杰;;循证护理在幽门螺杆菌阳性患者治疗中的应用效果分析[J];中国继续医学教育;2015年10期

相关会议论文 前10条

1 裴仁治;李双月;马俊霞;张丕胜;刘旭辉;杜小红;李小平;陈冬;沙科娅;陈列光;曹俊杰;陈颖;;幽门螺杆菌阳性难治性特发性血小板减少性紫癜患者细胞凋亡的研究[A];2009年浙江省中医药学会血液病学术年会、浙江省中西医结合学会血液病学术年会暨国家级中西医结合血液病新进展继续教育学习班论文汇编[C];2009年

2 李天望;汪琪;;胃复春联合西药治疗幽门螺杆菌阳性慢性胃炎脾虚兼热型的临床研究[A];第二十五届全国中西医结合消化系统疾病学术会议论文集[C];2013年

3 徐三平;李彩丽;侯晓华;;80例幽门螺杆菌阳性根治18个月追踪[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（上册）[C];2007年

4 孙秋平;;中西医结合治疗幽门螺杆菌阳性慢性胃炎56例疗效分析[A];中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编[C];2000年

5 白雪峰;冯塞莲;毕荣;;枸橼酸铋雷尼替丁治疗幽门螺杆菌阳性消化性溃疡疗效观察[A];第二十次全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2008年

6 王洪艳;王峪;;中俄健康体检者幽门螺杆菌阳性率结果分析[A];中国康复医学会疗养康复专业委员会第二十四届学术会议论文汇编[C];2014年

7 李倩倩;谢红燕;冯劲东;颜海帆;;幽门螺杆菌根除治疗对幽门螺杆菌阳性的功能性消化不良患者的治疗效果[A];2016年《中国医院药学杂志》学术年会论文集[C];2016年

8 关瑞云;廖朝峰;;铝镁加混悬液联用埃索美拉唑治疗幽门螺杆菌阳性十二指肠溃疡的疗效观察[A];2014年中国药学大会暨第十四届中国药师周论文集[C];2014年

9 关瑞云;;铝镁加混悬液联用埃索美拉唑治疗幽门螺杆菌阳性十二指肠溃疡的疗效观察[A];2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周论文集[C];2012年

10 周毅;刘红华;;中西医结合与西医治疗幽门螺杆菌阳性消化性溃疡疗效对比[A];中华中医药学会脾胃病分会第二十三次全国脾胃病学术交流会论文汇编[C];2011年

相关重要报纸文章 前8条

1 王长洪;幽门螺杆菌相关胃炎的辨证治疗[N];中国中医药报;2001年

2 李益农;幽门螺杆菌相关疾病研究新结论[N];中国中医药报;2004年

3 步召德 北京大学肿瘤医院胃肠肿瘤中心主任医师;胃部“钉子户”：幽门螺杆菌到底要不要“杀”？[N];北京科技报;2018年

4 通讯员 曾帆;幽门螺杆菌感染率高 专家推荐四联疗法[N];大众卫生报;2018年

5 本报记者 郑旺;健康管理产业生机勃勃[N];中华工商时报;2013年

6 本报记者 刘小兵;“媒体人”警惕健康透支[N];光明日报;2011年

7 北京军区总医院 主任医师 张禹;老溃疡复发咋用药[N];家庭医生报;2009年

8 复旦大学附属中山医院教授 杨秉辉;呼唤医患“道德模式”[N];健康报;2007年

相关博士学位论文 前2条

1 刘有恃;幽门螺杆菌对克拉霉素耐药性及其机理的研究[D];浙江大学;2006年

2 孙钟海;解乐业教授学术思想与临床经验总结及英芪和胃丸治疗幽门螺杆菌阳性慢性胃炎的临床研究[D];山东中医药大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 周欢;幽门螺杆菌外膜囊泡诱导AD样tau病变[D];华中科技大学;2018年

2 贾雪雷;幽门螺杆菌感染胃炎辨证规律研究[D];南京中医药大学;2018年

3 古再丽阿依·阿不力孜;幽门螺杆菌感染与血脂、颈部血管斑块形成的关系[D];新疆医科大学;2018年

4 王蓝;云南省部分少数民族幽门螺杆菌感染现状及相关因素调查研究[D];昆明医科大学;2018年

5 陈醒醒;整合素β1对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞GES-1及胃癌细胞MGC803的作用研究[D];滨州医学院;2017年

6 叶剑芳;五联七天疗法对幽门螺杆菌感染初治患者的根除治疗的研究[D];南昌大学;2018年

7 石磊;幽门螺杆菌感染与结直肠肿瘤的关系研究[D];青岛大学;2018年

8 孟王萍;幽门螺杆菌感染和5-羟色胺与功能性消化不良发病因素的相关性研究[D];西南医科大学;2017年

9 张强;根除幽门螺杆菌对功能性消化不良患者影响的临床研究[D];西安医学院;2017年

10 汪琪;胃复春联合西药治疗幽门螺杆菌阳性慢性胃炎脾虚兼热型的临床研究[D];湖北中医药大学;2013年

，

本文编号：2647802