胍基丁胺对谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的影响

发布时间：2020-05-09 12:18

【摘要】：目的：研究一定浓度谷氨酸对PC12细胞的损伤作用，，同时观察胍基丁胺对谷氨酸作用的影响，并初步探讨胍基丁胺的作用机制。方法：采用MTT法观察谷氨酸和胍基丁胺对PC12细胞活性的影响，荧光显微镜吖啶橙染色法观察细胞凋亡的形态特征，琼脂糖凝胶电泳观察细胞有无DNA断裂，结合流式细胞仪定量检测凋亡峰(AP)。结果：(1)MTT实验发现：谷氨酸浓度在2.5-20mmol／L范围内能明显抑制细胞活性，并呈浓度和时间依赖性(2)琼脂糖凝胶电泳检测到DNA断裂条带。(3)以5mmol／L谷氨酸作用24h为损伤模型，用吖啶橙染色荧光显微镜观察可见PC12细胞发生凋亡样改变。(4)在损伤模型组中加入不同浓度的胍基丁胺，MTT实验发现胍基丁胺浓度在0.1mmol／L～5mmol／L范围内能明显提高细胞活性。其中1mmol／L胍基丁胺+5mmol／L谷氨酸实验组在琼脂糖凝胶电泳分析中没有见到DNA梯形条带：流式细胞仪检测特凋亡峰，可见胍基丁胺能明显下降损伤模型组的细胞凋亡率，并随胍基丁胺的浓度加大，凋亡率随之下降。 结论：较高浓度的谷氨酸有兴奋毒性作用，细胞死亡机制主要为诱导细胞凋亡。胍基丁胺能明显拮抗谷氨酸所致的PC12细胞凋亡，其 肌基丁胺对谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的影响中文摘要 机制可能和其非竞争性阻断谷氨酸的NMDA受体，减少钙离子内流， 以及改善线粒体功能和减轻谷氨酸的氧化毒性有关。
【图文】：

一80120umo比均能明显抑制DNA断裂，0.1~ol几肌基丁胺与损伤组相比无明显改变(图2一2)。A.MK一80120umol/L组B.肌基丁胺lrnrno比组C.肌基丁胺0.lmmo比组D.谷氨酸组E.正常细胞对照组E200bpDNA标准图2一2各实验组对PC12细胞DNA断裂的影响3流式细胞仪检测凋亡峰细胞破膜后，断裂的DNA被释放，DNA在组方图上出现二倍体峰减少，GI峰左侧出现亚二倍体细胞峰的峰群，即凋亡峰(Ap峰)。结果显示不同剂量肌基丁胺0.1~of几，1~ol几，5~of几均能明显降低模型组即5~ol几谷氨酸作用与细胞24h的凋亡率。结果如下。见表2一2，图2一3
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R749.1

【参考文献】

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本文编号：2656128