氨基胍改善甲基乙二醛诱导的SK-N-SH细胞中tau蛋白过度磷酸化

发布时间：2020-06-21 01:20

【摘要】：研究背景:在许多有活性的羰基化合物和糖化终末产物(AGEs)的前体中,甲基乙二醛(MG)可能对细胞内的AGEs的形成起着关键作用。以前的研究已经报道AGEs与阿尔茨海默病(AD)的发病机制有关,即与由异常磷酸化的tau聚合而成的神经原纤维缠结(NFTs)的形成有关。研究报道AD患者体内的MG水平是正常人体内的两倍,而其在脑脊液的浓度是血浆中的五到七倍。MG的特异清除酶——乙二醛酶I(Glyoxalase I)的表达在AD的早期阶段有减少,而在AD的中末期有增加。另外有研究证明乙二醛酶I在tau的转基因小鼠P301L中有明显的升高,这表明MG与tau之间有联系。而细胞内的AGEs与PHF-tau共定位,AGEs和糖化的tau蛋白培养可以诱导氧化应激并最终导致神经功能障碍和细胞死亡,暗示了AGEs和tau之间有某种内在联系。我们推测,MG作为AGEs重要的高活性的前体,可能是AD的tau病理性改变重要的上游致病因素之一。因此,探明其在tau蛋白异常磷酸化中的机制,对进一步理解AD和寻找新的防治途径具有重要意义。 目的:探讨MG对tau蛋白磷酸化的影响及其作用机制。 方法:用不同浓度的MG处理SK-N-SH细胞不同时间,观察在不影响细胞活性的MG浓度和处理时间的条件下,通过western blotting和免疫荧光等方法检测经MG处理后的细胞,tau蛋白磷酸化变化模式,并探讨tau磷酸化相关的蛋白激酶和磷酸酶活性及其在tau磷酸化中的作用;使用相关激酶的抑制剂和氨基胍阐明MG影响tau蛋白异常磷酸化的可能机制。 结果: 1.用不同浓度的MG处理SK-N-SH细胞1小时,或者用1.0 mM浓度的MG处理细胞不同时间,发现用少于5 mM的MG处理细胞1小时或者用1 mM的MG处理细胞时间低于4小时对细胞的活性无明显影响。 2.用不同浓度的MG分别处理细胞1小时,或者用1.0 mM浓度的MG处理细胞不同小时,可以观察到MG能够诱导tau在许多不同位点磷酸化。 3. GSK-3β和p38在MG诱导的tau异常磷酸化中激活。 4. JNK,Erk1/2,cdk5在MG诱导的tau异常磷酸化中不起作用。 5. PP2A的活性在MG诱导的tau异常磷酸化中未改变。 6.使用GSK-3β和p38的抑制剂能够减弱MG诱导的tau的异常磷酸化。 7.使用氨基胍(AG)处理细胞,能够改善MG引起的tau的异常磷酸化。 结论:MG能够引起SK-N-SH细胞中tau蛋白的磷酸化,这可能是通过调节GSK-3β和p38,而氨基胍可以逆转tau蛋白的磷酸化。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R749.16

【共引文献】

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本文编号：2723266