褪黑素对吗啡依赖大鼠戒断症状的抑制作用及其分子机制的研究

发布时间：2020-06-21 17:33

【摘要】：药物依赖是一种慢性、复发性脑疾病，主要特点是成瘾者往往存在对依赖药物的强烈渴求，导致他们不顾后果地继续觅药和用药行为。持续的用药行为导致中枢神经系统发生适应性的变化，进而引起耐受、身体依赖、敏感、渴望和复吸。药物滥用和依赖已经成为严重威胁人类健康、社会稳定、经济发展的全球性问题。阿片类物质是全球尤其是亚洲最常见的违法滥用药物之一，在我国滥用的阿片类物质主要是海洛因和吗啡。阿片类依赖的病原是外源性阿片类化合物，靶部位是阿片受体。阿片受体在病原的作用下发生的一系列受体后效应涉及机体很多系统的功能紊乱。目前治疗阿片类药物成瘾的方法主要有以阿片受体激动剂进行剂量递减的替代治疗和对症治疗。然而，替代治疗的实质是以另一种阿片类似物进行替代以缓解成瘾者的戒断症状，不能解决替代药物潜在的成瘾性，势必造成新的药瘾，因此不是真正意义上的治疗。对症治疗方法是应用非阿片类激动剂如抗焦虑药、抗抑郁药、弛缓药等进行针对戒断症状的治疗，这些药物又都有长期的副作用。因此，寻找安全有效、能迅速脱毒到完全康复的药物已成当务之急。褪黑素(Melatonin，MT)是一种主要由松果体(pineal gland，PG)细胞分泌的重要激素。在体内MT不但调节时间和季节节律，而且还具有催眠、镇痛、抗氧化、抗应激、抗衰老、抗肿瘤和免疫调节等作用。MT能抑制吗啡的精神和躯体依赖，而本身无依赖性。MT抑制吗啡躯体和精神依赖的作用机制尚不完全清楚。因此本实验以剂量递增法建立吗啡依赖模型，经纳洛酮催促戒断建立吗啡戒断大鼠模型，系统研究MT对纳络酮诱导的吗啡依赖大鼠相关脑区cAMP、 cGMP、CREB、CaMKⅡ等信息分子和mAChR基因表达的影响，以探讨MT抑制吗啡戒断症状的分子机制。方法及结果 1 MT对吗啡依赖大鼠躯体和精神依赖的抑制作用 (1) MT对吗啡依赖大鼠纳络酮催促戒断综合征的抑制作用 WP=5 Wistar大鼠70只，雌雄各半，体重180g～230g，随机分为生理盐水对照组(NS组)、吗啡依赖组(MOR组)、纳洛酮催促戒断组(NAL组)、MT25、50及100mg·kg-1治疗组(MT25、MT50和MT100组)和MT25mg·kg-1与吗啡复合组(mMT25组)，每组10只。应用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡(10～50mg·kg-1，每日2次)和纳络酮(5mg·kg-1, ip)催促戒断建立吗啡躯体依赖模型，在纳络酮催促戒断前30min用不同剂量的MT进行治疗。观察各组催促戒断症状及体重减轻情况。数据用 ±s表示，用SPSS统计分析软件进行统计学分析，各组均数的比较行单因素方差分析(ANOVA)，用最小显著差异法(least significant difference, LSD)作两两比较，P0.05为有显著性差异。结果显示：(1) 剂量递增法慢性吗啡处理5天后ip NAL催促戒断可明显地诱发湿狗样颤抖、眼睑下垂、腹泻和齿颤等催促戒断症状。NAL组大鼠的戒断分值及体重下降明显高于MOR组(P0.01)，结果表明吗啡依赖和催促戒断模型建立成功。(2) 纳络酮催促戒断前ip MT 25 mg·kg-1～100 mg·kg-1能明显缓解吗啡依赖大鼠的催促戒断症状，其戒断症状分值和戒断反应前后的体重下降明显低于MOR组(P0.05, P0.01), 且呈剂量依赖性。mMT25组对戒断症状的抑制作用小于MT25组(P0.05)。 (2) MT对吗啡诱导的条件性位置偏爱的抑制作用采用吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference，CPP)装置研究MT对大鼠吗啡精神依赖的抑制作用。Wistar雄性大鼠50只，体重180g～230g，随机分为生理盐水对照组(NS组)、吗啡依赖组(MOR组)、MT25、50和100mg·kg-1治疗组(MT25、MT50和MT100组)，每组10只。实验采用大鼠非偏爱的白盒作为伴药盒，应用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡诱导吗啡CPP模型。MOR组和MT治疗组交替皮下注射盐酸吗啡(10~70mg·kg-1，连续7d, 8:00)或生理盐水(16:00)每日各一次。注射后交替放入伴药盒或非伴拌药盒40min。生理盐水组sc等体积的NS隔次将大鼠放入伴药盒或非伴拌药盒内40min。第8天进行CPP测试。CPP测试前30min MT组分别腹腔注射MT25、50和100mg·kg-1，MOR注射生理盐水。数据用 ±s表示，用SPSS统计分析软件进行统计学分析，各组均数的比较行单因素方差分析(ANOVA)，用最小显著差异法(LSD)作两两比较，P0.05为有显著性差异。结果显示：(1) 正如我们所料，在预实验阶段大鼠对黑盒和白盒的偏爱明显不同，大鼠在黑盒和白盒的平均停留时间分别为587±72s和313±72s WP=6 (P0.01)，表明大鼠在我们实验条件下对黑盒有天然嗜好和偏爱，所以在训练阶段以大鼠非天然偏爱的白盒为伴药盒。(2) 吗啡训练后，MOR组大鼠在拌药盒的停留比NS组明显增加(646±119s vs 426±43s, P0.01)。表明大鼠经过7天的吗啡训练对伴药盒产生明显的偏爱，吗啡诱导的大鼠CPP模型成功建立。在CPP试验前用MT进行治疗后，MT25、MT50和MT100组大鼠在伴药箱的停留时间分别是524±88s、462±102s和422±115s，与MOR组比较有显著差异(P0.05，P0.01)。 (3) MT对吗啡依赖大鼠复吸行为的影响前面的研究已经证实MT能抑制吗啡依赖的戒断症状和吗啡诱导的CPP的表达，但MT能否缓解吗啡依赖大鼠的复吸行为尚不清楚。本实验采用吗啡CPP重建模型，研究MT对吗啡依赖大鼠复吸行为的影响。50只Wistar?
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R749.6

【参考文献】