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受体导入BDNF对AD海马神经元再生的影响

发布时间:2020-07-08 03:35
【摘要】: 目的 静脉注射经过分子修饰的人重组脑源性神经营养因子的复合物,观察其在体条件下对阿尔茨海默病转基因鼠的海马CA1区神经元数目的影响。 方法 1.材料 BDNF、BDNF-PEG-biotin/OX26-SA、PEG-biotin、OX26-SA和Sphacryl S300HR层析柱购自Pharmacia,老年痴呆转基因鼠购自北京中国协和医科大学,实验所需其它试剂由我校组织工程学实验室提供。 2.制备PEG-biotin/OX26-SA复合物 参照W.D.等法人的方法,通过抗生物素蛋白-生物素技术,将3.9mg的PEG-biotin和6.5mg的OX26-SA共同混合于1ml的0.05M Na_2HPO_4/0.5M NaCl(PH=7.0)中。该反应室温下进行30分钟。将样品放置到Sphacryl S300HR层析柱中,用0.01M Na_2HPO_4/0.5M NaCl(PH=7.4)配制的0.05%聚山梨醇酯-20以30ml/hr的速度洗脱产物PEG-biotin/OX26-SA,并用Centriprep-10浓缩,作为实验对照组用药。 3.实验动物分组 取40只AD转基因鼠,随机分为实验组、实验对照组和空白对照组,每组10只。实验组静脉注射BDNF-PEG-biotin/OX26-SA复合物,实验对照组一组静脉注射PEG-biotin/OX26-SA复合物,另一组注射BDNF,空白对照组静脉注射0.9%的生理盐水。每日清晨经鼠尾静脉注射给药,连续一周。 4.HE染色和海马神经元计数 在最后一次给药后的24小时处死动物并取脑。切除3mm额极皮质后取冠状切片,固定、包埋、切片、脱蜡,行HE染色,光学显微镜下计数海马CA1区神经元的数目,以确证经过分子修饰的BDNF外周给药后对海马神经元的作用。 5.统计学分析 每组数据用平均值土标准差表示,组间采用单因素方差分析。 结果 通过键合反应将PEG一hiotin与0X26一SA键合,制备对照药物PEG- bioti可0X26一SA。经鼠尾静脉注射给药,连续一周后,实验组海马CAI区 神经元的数目增加,实验对照组海马CAI区神经元的密度无明显变化。实 验组与对照组治疗结果差异显著。 结论 经过分子修饰的BDNF在体内可以穿越血脑屏障,其外周给药对AD 鼠海马神经元有保护作用。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R749.161

【参考文献】

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1 刘朝晖,胡海涛,马东亮,许杰华,杨蓬勃;重组人BDNF对Alzheimer病模型神经元作用的实验研究[J];西安交通大学学报(医学版);2003年01期



本文编号:2746040

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