Ghrelin通过影响Dkk-1的表达调控WNT信号通路改善糖尿病大鼠认知功能

发布时间：2020-07-21 18:23

【摘要】：目的:探讨Ghrelin对糖尿病大鼠海马组织Tau蛋白及WNT信号通路相关蛋白表达的影响,明确WNT信号通路在糖尿病大鼠学习和记忆功能紊乱中所发挥的作用。方法:将雄性SD大鼠60只随机平均分为四组:NC组(对照组,n=15)、DM组(DM,n=15)、DM1组(DM+Ghrelin,n=15组)、DM2组(DM+Ghrelin+D-lys3-GHRP-6,n=15组)。腹腔注射STZ构建糖尿病大鼠模型,Morris水迷宫实验评价大鼠空间学习能力和记忆能力;电镜观察大鼠海马CA1区神经元微观结构,普通显微镜下观察HE染色后大鼠各组海马CA1区神经元形态特点;ELISA检测大鼠血清DKK-1的表达;荧光定量PCR检测大鼠海马DKK-1、β-catenin、磷酸化GSK-3β及总Tau mRNA水平;Western blot检测大鼠海马DKK-1、磷酸化β-catenin、GSK-3β、总Tau及磷酸化Tau的蛋白水平;免疫组化检测大鼠海马中DKK-1、β-catenin的蛋白表达;免疫荧光检测大鼠海马中磷酸化GSK-3β、磷酸化Tau的蛋白表达。结果:糖尿病组与正常对照组相比,在目标象限中穿越平台次数显著下调,逃避潜伏期显著上调(P0.05);神经元细胞肿胀、线粒体空泡变性(P0.05),神经元细胞排列紊乱,细胞核固缩等;血清、海马组织中DKK-1、海马组织中p-Tau的表达明显升高(P0.05),海马中β-catenin、P-GSK-3β表达下降(P0.05)。Ghrelin干预组大鼠与糖尿病组相比较,穿越平台次数显著上调,逃避潜伏期明显下调(P0.05);神经元细胞形态完整,线粒体发达、密度增加(P0.05),神经元排列整齐、细胞层数清晰;血清、海马组织中DKK-1、海马组织中p-Tau的表达明显降低(P0.05),海马中β-catenin、P-GSK-3β的表达升高(P0.05)。联合应用Ghrelin和GHSR-1a受体拮抗剂Ghrelin+D-lys3-GHRP-6后,Ghrelin上述作用被阻断(P0.05)。结论:1:WNT信号通路被抑制,Tau蛋白的磷酸化增加可能是糖尿病认知功能障碍的致病机制之一;2:Ghrelin改善糖尿病大鼠学习记忆功能的机制至少部分与下调海马DKK-1的表达、调控WNT信号通路,影响Tau蛋白的磷酸化有关。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R749.1

【参考文献】