漆黄素抗抑郁作用及抗抑郁药物治疗应激后Ahi1小鼠的机制研究

发布时间：2020-07-25 09:31

【摘要】：目前抑郁症是影响全球3.5亿人的最常见精神科疾病。预计到2020年,抑郁症将成为第二大死因。抑郁症给整个社会带来了沉重的经济负担,占疾病总负担的10.3%。目前抑郁症治疗手段有限的主要原因在于抑郁症的发生机制不明,虽然研究发现单胺类递质(5-羟色胺、去甲肾上腺素及多巴胺)、谷氨酸受体、表观遗传修饰、下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴、炎性细胞因子和神经营养因子等参与其机制发生,但均缺乏令人信服的证据。目前抑郁症治疗是以单胺类神经递质的失衡假说为依据开发了一系列抗抑郁药,如三环类抗抑郁药物、5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)。但这些抗抑郁药均存在明显的治疗滞后效应,且其有很大的副作用,所以研发出新型有效抗抑郁药社会意义重大。第一部分研究了黄酮类化合物漆黄素对抑郁的治疗作用及其机制。漆黄素(Fisetin)是黄酮类小分子化合物,大量存在于水果和蔬菜中。既往研究证实其具有抗氧化性、抗炎性及神经保护作用,因此被认为具有治疗神经疾病如中风、亨廷顿疾病和阿尔兹海默症的作用。目前尚不清楚漆黄素是否具有抗抑郁的作用。因此在两种不同的动物抑郁模型中研究了漆黄素的抗抑郁作用。首先将普通的ICR小鼠进行空间行为限制,小鼠表现出抑郁样行为后对其进行漆黄素处理。悬尾实验和强迫游泳实验证实漆黄素显著降低小鼠的不动时间,表明其具有一定的抗抑郁作用。与此同时,我们用漆黄素治疗Ahi1基因敲除小鼠因为Ahi1基因敲除小鼠具有稳定的抑郁样表型。同样,漆黄素显著改善了Ahi1基因敲除小鼠抑郁样行为。TrkB信号通路在抑郁症发生机制中发挥重要的作用;研究结果发现漆黄素能快速增加TrkB的磷酸化水平。给予Trk B抑制剂(K252a)显著降低了小鼠脑内的TrkB的磷酸化水平,阻断了漆黄素升高磷酸化TrkB的作用,TrkB抑制剂K252a也阻断了漆黄素的抗抑郁效果。这些结果表明漆黄素通过激活TrkB的信号通路起到抗抑郁的作用。由于漆黄素价格便宜和其良好的安全特性,漆黄素和其衍生物有希望成为高效抗抑郁药物。第二部分的研究是关于抗抑郁药物治疗应激后Ahi1小鼠的机制研究。首先将Ahi1基因敲除小鼠进行了两周的空间行为限制,行为学观察到对照小鼠和Ahi1基因敲除小鼠的抑郁程度均增加;而通过三周的抗抑郁药氟西汀治疗,Ahi1基因敲除小鼠对抗抑郁药物不敏感。其次,通过Western Blot实验,检测到氟西汀治疗应激后的对照小鼠的Ahi1蛋白水平均增加,表明Ahi1可能参与了抗抑郁药物治疗的过程。实验结果表明氟西汀治疗应激后的对照小鼠和ICR小鼠中的海马神经元数目增加,而氟西汀治疗对Ahi1基因敲除小鼠海马神经元数目增加不明显。最后,Ahi1基因敲除小鼠小鼠细胞核内中的Cend1水平降低,而Cend1对神经再生有重要调控作用,因此提示了Ahi1通过调控Cend1细胞内分布起到调控神经再生和抗抑郁作用。研究结果均表明Ahi1有潜力成为治疗抑郁症的治疗靶点,为抑郁症药物的开发提供了新的思路。研究结果表明TrkB激活剂漆黄素和其衍生物可能将向临床转化为高效抗抑郁药物;同时Ahi1蛋白参与调控抗抑郁药物引起的神经再生;Ahi1蛋白表达的减少会造成神经再生减少和抗抑郁效果的降低,因此Ahi1蛋白及其信号通路也是抑郁症治疗的潜在靶点。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R749.4
【图文】：

抑郁作用及抗抑郁药物治疗应激后 Ahi1 小鼠的机制研究 箱中继续培养（所有操作在操净台中进行）。 细胞给药：细胞传代 24 小时后，镜下观察细胞贴壁良好，当六率达到 50%以上时，细胞换液，每孔 2ml，Dex 组细胞培养液中加入终浓度 20μM），Control 组细胞加入 2μl 等体积 DMSO 溶液。十放入培养箱培养 72 小时。Fisetin(40μM）给予细胞处理。.7 实验分组及动物处理了清晰表明整个实验的安排过程，我们将实验的每个时间节点标注

漆黄素抗抑郁作用及抗抑郁药物治疗应激后 Ahi1 小鼠的机制研究 第一部分间行为限制两周后的小鼠发现存在抑郁样表型后，随后进行为期两周的 Fisetin 治疗，之后再对小鼠进行治疗后的行为学检测。在为期进行的两周的 Fisetin 治疗后，我们发现小鼠悬尾实验和强迫游泳实验的不动时间均明显降低，表示存在着明显的抗抑郁样表现（图 1-E，F）。综上所述，我们得出结论，Fisetin 能治疗空间行为限制诱导的抑郁模型小鼠。

第一部分 漆黄素抗抑郁作用及抗抑郁药物治疗应激后 Ahi1 小鼠的机制研究2.2 漆黄素改善 Ahi1 KO 小鼠的抑郁样表型漆黄素在空间行为限制模型诱导的抑郁小鼠中表现出了抗抑郁作用。为了更加明确漆黄素的抗抑郁作用，我们选择了另外一种抑郁模型小鼠，也就是我们实验室拥有的 Ahi1 基因敲除小鼠。在先前的研究报道中，我们已经证实过 Ahi1 缺失会导致抑郁样的行为。所以我们将 Ahi1 基因敲除小鼠也作为一种抑郁模型。通过连续给予漆黄素三周的治疗，我们发现 Ahi1 基因敲除小鼠在第二周的行为学（悬尾实验 TST 和强迫游泳实验 FST）检测中已经观察到小鼠抗抑郁的表型（图 2-C，D）。

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 Shangli Cai;Shucai Huang;Wei Hao;;New hypothesis and treatment targets of depression:an integrated view of key findings[J];Neuroscience Bulletin;2015年01期

2 ;Antidepressant-like effects of the ethanolic extract of XiaobuxinTang,a traditional Chinese herbal prescription in animal models of depression[J];Chinese Medical Journal;2007年20期

本文编号：2769649