伴自杀的抑郁症的血浆代谢组学研究

发布时间：2020-07-29 09:58

【摘要】：背景及目的：全世界每年约有一百万自杀和上千万自杀未遂事件发生。事实上，自杀不仅仅是一种应激反应，广义上是指一种精神障碍综合症。尽管自杀是重型抑郁最严重的后果，但绝大多数的抑郁症患者从未尝试或自杀。这也就意味着自杀行为可能是一种区别于重型抑郁而独立存在的疾病。然而，由于这种区别于重型抑郁的发病机制至今仍未完全阐明，导致目前关于伴自杀的重型抑郁靶向治疗的研究停滞不前。本研究采用基于1H-NMR的代谢组学方法，应用核磁共振氢谱仪检测正常对照组、抑郁不伴有自杀意图组和出现过自杀意图的抑郁患者血浆标本，得到代谢指纹图谱，采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行模式识别，结合多种统计学方法，并通过模型分析和非参数检验鉴别鉴定出区别于抑郁不伴自杀企图及健康对照组，属于伴有自杀倾向的抑郁症的血浆代谢产物的变化及标志性的代谢产物。方法： 1.研究对象的纳入：选取35例健康人作为正常对照组；选取符合纳入标准的56例抑郁症患者作为疾病组：其中35例从未出现自杀企图，21例发病期间出现过自杀企图。 2.标本采集：用EDTA真空抗凝采血管采集35例健康人及56例患者静脉血，分离并收集血浆。将血浆分装并保存在-80℃冰箱中，避免反复冻融。 3.建立基于H1-NMR技术的血浆代谢组学分析方法，包括实验方法和模式识别方法的选择。采用建立的方法对正常对照组和实验组血浆进行代谢组学分析，找出并鉴定三组血浆中差异表达的代谢产物。 4.数据分析：通过多变量统计分析方法对获得的数据进行分析，经过积分数据归一化后，利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)过滤掉与反应没有直接关系的变化并进行模式识别。并将三组样本血浆中的主要代谢产物的积分值通过非参数检验方法分析，p0.05视为差异有统计学意义。结果： 1.与正常对照组和抑郁不伴有自杀企图组相比，抑郁伴有自杀企图患者血浆的H1-NMR代谢指纹谱图波峰水平有明显差异，提示其代谢产物成分有明显差异。 2.与正常对照组血浆代谢产物相比，在抑郁伴有自杀组的血浆中，鉴定出14个差异表达的代谢产物：高密度脂蛋白(HDL)，极低密度脂蛋白(VLDL)，葡萄糖，丙酮，牛磺酸，胆固醇，不饱和脂类，丙酮酸盐，醋酸，乳酸，丙氨酸，缬氨酸，甘氨酸，谷氨酰胺等波峰有增高或降低等表现。 3.与抑郁不伴有自杀企图组代谢产物相比，在抑郁伴有自杀组的血浆中，鉴定出11个差异表达的代谢产物：肌醇，葡萄糖，丙酮酸，丙氨酸，甘氨酸，牛磺酸，胆固醇，低密度脂蛋白(LDL)，极低密度脂蛋白(VLDL)不饱和脂类和乳酸等波峰有增高或降低等表现 4.采用多种统计学比较分析，鉴定出抑郁伴有自杀企图血浆中特异表达的代谢产物，可归结为三类：脂质代谢紊乱类(LDL，VLDL，不饱和脂类，胆固醇)，脂质代谢相关物质(葡萄糖，丙酮酸盐，乳酸)，氨基酸类(丙氨酸，甘氨酸和牛磺酸)。结论：通过基于NMR技术的血浆代谢组学研究，提示外周脂质和氨基酸代谢紊乱增加了抑郁症患者的自杀风险。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R749.4
【图文】：

流程图,自杀意图,代谢组学,标志物

15图 1. 采用 NMR 的代谢组学方法，筛选抑郁伴自杀意图相关血浆标志物流程。Figure 1. An overview of NMR-based metabonomic workflow identifying plasmmetabolite biomarkers for MDD with suicide attempts.1.2.3 样品制备在测试前，将血浆样品取出并在室温条件下解冻。每 200ul 血浆样品与 40的磷酸盐溶液(0.2M Na2HPO4/0.2 M NaH2PO4, pH 7.4)充分振荡混匀后 4℃离12000g/min，离心 10 分钟，取 500ul 上清加入 5mm 核磁共振专用测试管中，加

波谱图,自杀意图,抑郁症,磁共振波谱

图 2 伴自杀意图抑郁症，不伴自杀意图的抑郁症以及健康对照血浆磁共振波谱。（A-B-C）代表性的伴自杀意图的抑郁症患者，不伴自杀意图的抑郁症与正常对照的 600 MHz 1D-CPMG波谱图。Fig2 NMR spectra of depressed patients with suicide attempts, depressed patients(non-suicideattempts) and healthy controls. (A-B-C) Representative 600 MHz one-dimensionalCarr Purcell Meiboom Gill (1D-CPMG)1H NMR spectra of blood plasma samples fromdepressed patients with suicide attempts, depressed patients(non-suicide attempts) and healthycontrols.2.3 多变量统计分析抑郁症与正常对照的样本

自杀意图

图 3 3a.OPLS-DA 得分图显示抑郁伴自杀意图组( )能够与不伴自杀意图抑郁组( )明显区分开; 3b.OPLS-DA 得分图显示抑郁伴自杀意图组( )能够与正常组( )明显区分开。Figure 3 3a.OPLS-DA score plots displaying discrimination between depressed patients withsuicide attempts ( ) and depressed patients (non-suicide attempts) ( ); 3b.OPLS-DA scoreplots displaying discrimination between depressed patients with suicide attempts ( ) andhealthy controls ( ).因 OPLS-DA 是一种监督的多变量统计分析方法，存在过度拟合的可能。因此，本研究采用排列验证（permutation test）去验证该 OPLS-DA 模型是否可靠。分析发现，该 OPLS-DA 模型的 R2 与 Q2 值明显大于其它置换的 R2 与 Q2。这说明该OPLS-DA 模型是可靠的，不存在过度拟合。

【参考文献】