AD患者ApoE基因SNP分析及神经保护肽Humanin抗AD作用的研究和表达

发布时间：2020-08-23 14:08

【摘要】： 第一部分 阿尔茨海默病(AD)ApoE基因SNP分析 背景和目的：老年性痴呆是21世纪医学领域面临的一大挑战。在西方国家，本病已是位于心脏病、肿瘤和中风之后导致死亡的第4位疾病。我国也将对老年性痴呆的流行病学调查，列为国家“九五”攻关计划。通过北京、上海等39个地区4万多名老人的调查，显示55岁以上人群老年性痴呆的患病率接近3％，65岁以上人群患病率超过5％。在60岁以上的老年人群中，平均每增加5岁，老年性痴呆的患病危险度会增加1.85倍。目前我国60岁以上的老人已达1.2亿，其中大约有500万老年性痴呆患者，约占世界总病例数的四分之一。估计到2025年我国老年人口比例将占全国人口20％，按照国内外的研究资料每十个老年人就有一个出现不同程度的痴呆症状，这样老年性痴呆将成为每一个中国家庭必须面对的问题，老年性痴呆发病率的不断增长，不仅给社会带来了巨大的压力，还造成了沉重的经济负担。因此对老年性痴呆的研究，已到刻不容缓的地步。 迄今老年性痴呆病因不明，近年国内外大量研究重点集中在：遗传学、免疫学、病毒感染、神经递质和神经内分泌等方面，结果显示许多因素与该病发病有关。 环境因素研究显示，铝与细胞核内的染色体结合可影响到基因的表达，AD的某些脑区铝的浓度可达正常脑的10-30倍，铝选择性地分布于含有神经纤维缠结(NFT)的神经之中，老年斑(SP)核心中也有铝的沉积。 由于某些由病毒引起的慢性神经变性疾病(羊痒症(Scapie).Kwru病Creutzfeldt-Jacob病(C-J病)等的临床症状和病理变化和老年性痴呆有不少相似之处，从而想到老年性痴呆可能与病毒感染有关，有些实验结果也间接地证明了老年性痴呆可能与病毒感染有关。 遗传学研究提示，AD具有家庭聚集性，40％的患者有阳性家族史，呈常染色体显性遗传及多基因遗传。目前认为第21号、9号、14号染色体存在基因异常，近几年又发现第19号染色体ApoE基因的异常，可能与老年性痴呆发病有一定关系。并认为ApoE4等位基因以量相关的形式增加阿尔茨海默病(AD)发病风险。 浙江大学博士论文 摘要 尸检发现，在AD患者老年斑和神经纤维缠结结构中有大量活性载脂蛋白E(ApoE) 沉积，而脑脊液中Ap0E水平则低于正常对照组，提示ApoE异常沉积可能参与了 AD的发病过程。APoE作为AD易感基因之一，与家族性及散发性AD均密切相 关。Ap0E基因多态性在不同的种族人群表现不同，其对AD发病的危险性也有 所差异。目前有关ApoE与AD关系的研究大多源自西方人群，而中国对AD患者 ApoE基因多态性分析主要是以限制性片段长度多态性分析技术(restriction 斤agment length polymorphism，RFLp)为基础，研究结果显示，AD患者ApoE4 基因频率较非AD患者明显增高，达36.4%，支持Ap0E4基因是AD发病危险因子 之一的观点。ApoEZ基因在sAD中明显减少，并提示ApoEZ基因可能具有预防 sAD发病的作用，也有学者认为ApoEZ基因是人类的长寿基因。ApoE3基因 频率在AD患者中明显下降，ApoE3具有减少B淀粉样蛋白积聚和保护tau蛋白 磷酸化，减少神经纤维缠结的形成作用，提示ApoE3基因可能具有减低AD发病 的危险性。 单核营酸多态性(single nuelootsde polynlorphism，SNp)作为一种遗传性 多态，具有分布广、数量多、易于批量检测等优点，以SNP为华础的关联分析及 连锁不平衡分析，己)’泛应用J‘神经科学领域中。本研究在国内外研究的签础l_， 采用PCR、基因测序等技术，对杭州地区老年人群中AD患者及浙北地区人群的 ApoE基因序列进行检测，分析其突变位点，以探讨Ap0E基因多态性在散发性AD 发病机制中的作用及研究ApoE基因多态性在浙北地区人群中的分布频率。 方法:选择1999年5月一2001年12月于我院就诊的AD患者30例，男10例， 女22例，平均年龄(70.31士9.74)岁。所有检查者均进行神经精神检查、神经系 统检查、神经放射检查，并根据美国精神障碍诊断与统计手册第四版(DSM一W) 的痴呆诊断标准进行初筛，再根据NENCDS一ADRDA做出AD诊断。痴呆患者 MMSE得分在8一12分;日常生活虽表得分在38~46;受检者为中至重度AD患 者。对照组选择同期进行健康体检者26例，男11例，女15例，平均年龄 (64，78到0.37)岁。病例组及对照组的年龄性别具有可比性。应用自动化测序仪 对ApoE基因PCR扩增产物进行测序，分析其基因单核普酸多态性，进行关联分 析。 同时我们取浙北地区94例健康体检者为研究对象，按年龄高低分为A、B、C 三组，应用聚合酶链反应扩增ApoE墓因第四外显子长为244bp的片段，扩增产物 经自动化测序仪进行测序，分析三组间基因单核昔酸多态性(SNP)，进行关联分 浙江大学博士论文 摘要 析。 结果:1、20.0。%的AD患者ApoE基因第462位单核营酸发生了C?G单碱基突 变，462c/G多态性与AD发病有明显关联(p0.05)。2、随着年龄的增长，ApoE 基因第526位点易发生C?T突变，第451单核营酸位点易出现C缺失突变 (P0.05)，A、B、C三组526C/T、45 IC/O的突变率分别为3.45%、14.81%、29.63% 及3，22%、9.68%、31.25%;年龄与526C/T、451C/0点突变的发生呈正相关。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R749.16
【图文】：

图2AD患者的ApoE基因测序结果人群组的ApoE基因SNP位点分析ApoE基因测序结果分析，第526位C/T突变、第470岁以上人群中多见，尸(0.05。见表2。n/

本文编号：2801615