钙离子和钙调蛋白在吗啡成瘾机理中的作用研究

发布时间：2020-09-04 20:23

　　 (一)、吗啡处理后原代培养的海马神经元细胞内[Ca~(2+)]i的变化目的:研究吗啡对原代培养的海马神经元细胞内[Ca~(2+)]i的影响,探索吗啡成瘾的神经生物学机制与可能的治疗途径。方法:取原代培养七天的成熟海马神经元,随机分为吗啡急性作用组、纳洛酮急性戒断组、吗啡慢性作用组、纳洛酮慢性戒断组、阿片受体拮抗剂预处理组、钙通道阻断剂预处理组、空白对照组,每组6皿细胞,运用新型荧光探针Fluo-4标记细胞内游离钙后,利用激光共聚焦显徽镜研究吗啡对大鼠原代培养的海马神经元细胞内[Ca~(2+)]i的影响。结果:急、慢性吗啡作用均引起[Ca~(2+)]i升高,加入纳洛酮戒断后,不能阻断吗啡引起的细胞内[Ca~(2+)]i升高,反而导致[Ca~(2+)]i异常增高;δ_2阿片受体选择性拮抗剂Naltrindole可以阻断吗啡引起的[Ca~(2+)]i增加,μ阿片受体选择性拮抗剂CTOP不能阻断吗啡引起的[Ca~(2+)]i增加;维拉帕米预处理海马神经元不能阻断吗啡引起的[Ca~(2+)]i升高,特异性内质网钙泵抑制剂(TG)预处理海马神经元抑制吗啡升高[Ca~(2+)]i的作用。结论:吗啡急慢性刺激引起原代培养的海马神经元细胞内[Ca~(2+)]i升高,δ_2阿片受体选择性拮抗剂可以阻断钙库释放引起的细胞内[Ca~(2+)]i升高。 (二)、吗啡处理后原代培养的海马神经元CaM蛋白的变化 目的:研究急、慢性吗啡处理后原代培养的海马神经元CaM蛋白的改变。方法:取原代培养七天的成熟海马神经元,随机分为:吗啡急性作用组,纳洛酮急性戒断组,吗啡慢性作用组,纳洛酮慢性戒断组,空白对照组,每组6皿细胞。采用细胞免疫荧光染色(Immunofluorescence assay,IFA,双抗体夹心法染色)及CaM蛋白相对含量检测。结果:急性吗啡干预和戒断对原代培养的海马神经元内CaM
【学位单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2005
【中图分类】：R749.64
【部分图文】：

突起的末端有膨大的生长锥结构，正在不断变化;细胞体呈圆形、梭形、三角形或多角形不等，胞体较厚，具有空泡状核，有明显的核仁;立体感强，常见“晕”。(图1一1)培养细胞中可包括几种神经元的类型和非神经元的“背景细胞”，即成纤维细胞、室管膜细胞和几种胶质细胞。成纤维细胞贴壁最快，呈扁平状，胞核卵园形，有并列的两粒小核仁，从胞体两端发出细长突起。胶质细胞贴附在胶原上和成纤维细胞形成一层“地毯”。神经细胞贴壁较慢，落在“地毯”上生长迁移和分化。图1一1典型的培养细胞

突起的末端有膨大的生长锥结构，正在不断变化;细胞体呈圆形、梭形、三角形或多角形不等，胞体较厚，具有空泡状核，有明显的核仁;立体感强，常见“晕”。(图1一1)培养细胞中可包括几种神经元的类型和非神经元的“背景细胞”，即成纤维细胞、室管膜细胞和几种胶质细胞。成纤维细胞贴壁最快，呈扁平状，胞核卵园形，有并列的两粒小核仁，从胞体两端发出细长突起。胶质细胞贴附在胶原上和成纤维细胞形成一层“地毯”。神经细胞贴壁较慢，落在“地毯”上生长迁移和分化。图1一1典型的培养细胞

急性吗啡刺激引起海马神经细胞荧光强度逐渐增强

【引证文献】

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1 李志强;XFM及赛拉嗪对大鼠中枢神经系统钙调蛋白和钙离子动力学的影响[D];东北农业大学;2013年

本文编号：2812545