Aβ25～35对大鼠海马下托及其投射源区的影响

发布时间：2020-09-18 12:23

　　阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease，AD)的早期表现为陈述性记忆障碍，病理检查发现脑内沉积有大量β淀粉样肽(Amyloid β-peptide，Aβ)，其中海马是最早、最易受累的部位，提示AD发病与内侧颞叶记忆系统损害有关。本实验目的：建立体部定位精确的动物模型，观察Aβ沉积于海马下托对内侧颞叶记忆系统的关键部位海马下托及其投射源区-隔区相关结构的影响。方法：(1) 以麦胚凝集素-辣根过氧化物酶(Wheat Germ Agglutinin-Horseradishperoxidase，WGA-HRP)逆行追踪法确定海马下托与其投射源区的体部定位关系；(2) 在确定隔-海马下托的体部定位关系后，将Wistar大鼠分实验组和正常对照组两组，将聚集状态的β淀粉样肽25～35(Aβ 25～35)压力注入实验组大鼠海马下托，存活3天，取材；(3) 根据体部定位关系在相应投射源区采用Nissl染色、免疫组化染色的方法对海马下托及其投射源区的胆碱能、γ-氨基丁酸(Gamma-Aminobutyric Acid，GABA)能和P物质(Substance P，SP)能投射神经元进行定位、定性分析(4) 应用KS400图像分析系统定对免疫组化结果进行定量分析，用方差进行统计学处理，观察投射源区若干化学能神经元的改变。结果：(1) 海马下托的主要投射源区为同侧的隔区(medial septal area，MS)，在上述部位找到存在明确体部定位关系的逆行标记细胞群。在Bregma0.7～0.48mm，MS冠状面为标记细胞高峰区，从而确定该部位为隔-海马下托通路中投射最集中、最主要的区域。(2) 投射源区三种化学能投射神经元占投射源区神经元总量比例不同：在MS：胆碱能神经元占19.37％，GABA能占35.80％，SP能占25.42％。细胞计数表明在MS ChAT阳性细胞数明显低于SP和GABA阳性细胞数。研究发现隔区GABA阳性神经元对海马神经元投射量很大，提示γ-氨基丁酸能神经元作用应值得关注；(3) Nissl染色发现：实验组Aβ注射侧海马下托投射源区MS，部分神经元发生逆行变性；(4) 免疫组化发现MS ChAT阳性安徽医科大学硕士学位论文细胞减少，实验组MS细胞计数与正常组比较，ChAT阳性和GABA阳性神经元平均细胞密度在MS均显著下降(P0 .01)，但是SP阳性神经元平均细胞密度在隔区下降不显著(P .05)，这说明不同化学能神经元对A日毒性的耐受力不同，也支持部分学者提出的P物质能对抗Ap毒性的观点.结论:(l)本文研究发现:海马下托的主要投射源区为同侧的MS，隔一海马下托存在明确的体部定位关系;(2)明确上述区域的胆碱能、Y一氨基丁酸能、P物质能神经元对海马下托有重要的投射;(3)凝聚状态的 A p 25一35对海马下托的神经毒性能直接波及下托投射源区隔MS，引起后者神经元减少，有毒性作用;(4)投射源区不同化学能神经元对Ap神经毒性敏感程度不同: 胆碱能和Y一氨基丁酸能很敏感.
【学位单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2003
【中图分类】：R749.16

【参考文献】