银杏叶提取物治疗迟发性运动障碍的疗效与S100B的关系

发布时间：2020-10-22 15:30

　　目的: (1)通过临床量表的测评,观察银杏叶提取物(EGB-761)治疗迟发性运动障碍患者的疗效。 (2)从蛋白和基因转录水平,观察银杏叶提取物治疗迟发性运动障碍的疗效与S100B的动态变化的关系,了解其活性状态,结合S100B蛋白在脑损伤修复中的作用,探讨其与迟发性运动障碍发病的关系。 (3)检测迟发性运动障碍患者中S100B位点的基因多态性,比较不同基因型之间银杏叶提取物治疗疗效的差异,拟发现迟发性运动障碍的易感基因,并进一步探讨银杏叶提取物治疗迟发性运动障碍的可能机理。方法: 选取迟发性运动障碍患者152例入组,符合精神障碍分类与诊断标准第4版(DSM-IV)精神分裂症诊断标准和Schooler和Kane制定的TD诊断标准,随机分为两组,分别给予EGB-761(240mg/天)和安慰剂,治疗12周(治疗期间维持原服用抗精神病药不变)。在治疗前后运用阳性与阴性症状量表(PANSS)与不自主运动量表(AIMS)对患者进行评定,并运用酶联免疫吸附法(ELISA)和限制性片段长度多态性(RFLP)方法分别检测迟发性运动障碍患者中S100B蛋白水平和基因多态性。运用SPSS13.0等统计软件对结果进行分析。结果: 银杏叶提取物(EGB761)治疗迟发性运动障碍患者平均年龄为45.33±7.10岁,平均病程为23.36±6.92年,治疗前后EGB组患者AIMS的减分率明显高于对照组,但是PANSS减分率变化与对照组无显著差异。同时,S100B蛋白水平在治疗前后也发生变化,EGB组合对照组的S100B蛋白水在治疗后均明显降低,但EGB组的下降趋势明显比对照组大。检测S100B基因位点多态性发现,S100B基因确实是迟发性运动障碍的易感基因之一,且其基因型的不同与银杏叶提取物的疗效有关,值得进一步研究分析。结论: 既往研究提示:TD可能与长期服用抗精神病药导致的黑质-纹状体部位神经元变性、凋亡有关。银杏叶提取物治疗迟发性运动障碍,对患者运动障碍的恢复、改善确有显著疗效,且治疗后作为脑损伤标记物的S100B蛋白水平显著低于治疗前,提示银杏叶提取物在治疗迟发性运动障碍的过程中,对其神经元功能恢复有一定作用。提示S100B基因可能是其易感性基因之一,S100B蛋白也有可能参与其治疗机制。
【学位单位】：广西师范大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2010
【中图分类】：R749.3
【部分图文】：

稀释方法,标准品,洗液

三、实验操作（一）实验准备1、浓缩洗液与双蒸水按1：10稀释制备洗液（1×），室温放置备用，确保一周内用毕2、贮存于-80℃的样本提前一天转移到-20℃继而4℃解冻。3、提前30分钟从冰箱中取出试剂盒，室温平衡。4、标准品：最高浓度标准品为40ng/ml，根据需要进行连续对倍稀释，如图1。

酶切图谱,位点,二态性,内切酶消化

（一）SNP 位点 PCR 扩增产物和酶切图谱rs9722位点共检测了100个迟发性运动障碍样本。rs9722位点是S100B基因上的C、T二态性SNP，PCR扩增目的基因片段长度为293bp，见图3。图3． rs9722位点PCR产物图 4 rs9722 产物酶切片段该位点碱基可被BccI内切酶消化，其酶切片段长度分别为110bp和183bp，在群体中形成三种基因型分别为T/T（纯合切开）、C/T（杂合切开）和C/C（纯合未切开），见图4。

内切酶消化,碱基,位点,杂合