脑缺血对阿尔茨海默病模型大鼠tau蛋白异常磷酸化及胆碱能系统影响的实验研究

发布时间：2020-10-26 04:42

　　 研究目的 1、探讨杏仁体注射Aβ25-35对大鼠学习记忆功能、脑皮质和海马tau蛋白异常磷酸化(Pser404-tau)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)的影响。 2、在阿尔茨海默病(AD)模型的基础上进行2-VO手术,探讨脑缺血对AD的影响。 3、观察2-VO术后大鼠脑中Pser404-tau、ChAT和AchE的变化,探讨脑缺血是否可以引起类AD样改变。 4、通过葛根素(Pue)对脑缺血大鼠和AD大鼠的干预研究,探讨Pue治疗AD的机理。 研究方法 1、模型的制作:AD模型的制作:SD大鼠以0.4%戊巴比妥钠麻醉,于脑立体定位仪下定位右侧杏仁体,用微量注射器缓慢匀速注入Aβ25-35 (5.0nmol/3μl);脑缺血(CI)模型的制作:SD大鼠麻醉后,分离双侧颈总动脉,永久结扎左侧,右侧夹闭60min后放开;AD+CI模型的制作:立体定位术后14天,将AD大鼠行脑缺血处理,方法同CI组。 2、Pue治疗组于立体定位术后14天/缺血手术后腹腔注射给药,剂量为80mg/kg/d,共7天。 3、分别在实验前、立体定位术后14天、21天进行Y-迷宫试验,检测大鼠学习记忆能力。 4、立体定位术后21天(即缺血术后7天)处死所有大鼠,应用免疫组化方法测定各组大鼠皮质和海马Pser404-tau、ChAT阳性细胞数的表达;应用比色法检测各组大鼠双侧海马AchE蛋白含量及活性的变化。 研究结果 1、Aβ25-35、脑缺血对SD大鼠的影响:Aβ25-35单侧杏仁体一次性注射可导致大鼠学习记忆功能障碍;AD模型大鼠皮质、海马的Pser404-tau阳性细胞数显著增高(P0.01),ChAT活性明显降低(P0.01);AD模型大鼠右侧海马AchE蛋白含量、活性明显降低(P0.05),左侧海马AchE蛋白含量及活性均无明显变化(P0.05)。CI组大鼠皮质、海马Pser404-tau阳性细胞数增高而ChAT活性降低(P值均小于0.05),双侧海马AchE蛋白含量和活性均降低(P0.05),且右侧海马AchE的变化较左侧更为显著。 2、脑缺血对AD的影响:相对于AD模型组,AD+CI组大鼠的记忆功能进一步下降,皮质和海马Pser404-tau阳性细胞数上升,ChAT活性下降(P0.05),右侧海马AchE蛋白含量降低,AchE活性也下降(P0.05)。 3、Pue可显著改善AD、缺血大鼠的学习记忆功能(P0.05);相对于AD/CI模型组,Pue治疗组Pser404-tau的阳性细胞数显著降低,而ChAT表达明显升高(P0.05);右侧海马AchE含量及活性升高(P0.05)。 研究结论 1、杏仁体注射Aβ25-35产生的神经毒性作用可导致脑内Ser404位点的tau蛋白异常磷酸化和胆碱能系统功能损害。 2、脑缺血可加重AD病变。 3、脑缺血可导致AD病变。 4、Pue能够改善AD的病理反应,缓解AD大鼠学习记忆障碍,其机制可能与Pue对抗β-淀粉样肽(Aβ)的神经毒性,扩张脑血管、改善微循环从而抑制tau蛋白异常磷酸化,提高中枢胆碱能系统功能有关。
【学位单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2005
【中图分类】：R749.16
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩略词
前言
文献综述
    一、阿尔茨海默病概述
        1、Aβ 与阿尔茨海默病
        2、tau 蛋白与阿尔茨海默病
    二、阿尔茨海默病与缺血性脑血管病
        1、 Aβ与缺血性脑血管病
        2、 tau 蛋白与缺血性脑血管病
        3、 能量代谢与缺血性脑血管病
        4、胆碱能系统与缺血性脑血管病
    三、阿尔茨海默病的防治
ser404-tau、ChAT、AchE 的变化'>第一部分 AD 大鼠脑缺血后 P_ser404-tau、ChAT、AchE 的变化
    1、材料与方法
        1.1 主要试剂与仪器
        1.2 动物来源及分组
        1.3 动物模型的制备
        1.4 行为学检测
        1.5 脑组织形态学检测
        1.6 指标的检测
    2、结果
        2.1 动物大体观察
        2.2 行为学测试结果
        2.3 脑组织形态学变化
ser404-tau 和ChAT 免疫组化的变化'>        2.4 脑组织P_ser404-tau 和ChAT 免疫组化的变化
        2.5 AchE 活性及蛋白含量的变化
第二部分 葛根素对脑缺血和 AD 大鼠脑保护机制的实验研究
    1、材料与方法
        1.1 主要试剂与仪器
        1.2 动物来源及分组
        1.3 动物模型的制备
        1.4 行为学检测
        1.5 脑组织形态学检测
        1.6 指标的检测
    2、结果
        2.1 动物大体观察
        2.2 行为学测试结果
        2.3 脑组织形态学变化
ser404-tau 和ChAT 免疫组化的变化'>        2.4 脑组织P_ser404-tau 和ChAT 免疫组化的变化
        2.5 AchE 活性及蛋白含量的变化
第三部分 讨论
    1、动物模型的建立
    2、A β与磷酸化tau 蛋白
    3、A β与胆碱能系统
    4、AD 与缺血性脑血管疾病
    5、Pue 对AD 大鼠保护机制的研究
结论
致谢
参考文献
附图
作者简介

【参考文献】

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1 李玺,张雪飞,乔成林;脑尔康对老年痴呆小鼠学习记忆障碍及脑M受体的影响[J];中国医药学报;2001年05期

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3 吴海琴,常明则,张桂莲,赵英贤;葛根素对大鼠全脑缺血再灌注后学习记忆障碍保护作用及其机制的研究[J];中风与神经疾病杂志;2004年04期

4 王跃春,王子栋;大鼠Y-型迷宫测试指标正常值的确定[J];中国行为医学科学;2003年03期

5 杨东旭,唐玉,胡小敏,刘进学,陈怡,金有豫;葛根素对β-淀粉样肽所致痴呆模型小鼠学习记忆的影响[J];中国临床药理学与治疗学;2004年06期

6 刘学源 ,赵伟康,徐品初;Aβ杏仁核注射对大鼠异常磷酸化tau蛋白表达的影响[J];中国现代医学杂志;2003年10期

7 吴琪;Alzheimer病神经原纤维缠结与tau蛋白研究[J];中国神经精神疾病杂志;2000年01期

8 朱庄庄,张祥义,冯莉;老年痴呆症的中医药研究进展[J];中国康复理论与实践;2002年06期

9 彭小松,陈晓春,黄俊山,朱元贵,李永坤,曾育琦;A~(β25-35)注射诱导大鼠海马神经元tau蛋白异常磷酸化[J];中华神经科杂志;2004年06期

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本文编号：2856509