吗啡依赖大鼠肾内内皮型一氧化氮合酶及水通道蛋白AQP1的表达变化的研究

发布时间：2020-11-06 07:32

　　 从所周知,滥用吗啡对健康的损害很大,吸毒都身体抵抗力降低,可以引起心、肝、肾功能损害。因此吗啡体内代谢的研究,越来越受到人们的关注。一氧化氮(NO)在1987 年被称为内皮源性舒张因子,是在一氧化氮合酶(NOS)的作用下,以左旋精氨酸和O2 为底物催化产生的。许多报道证明应用NOS 抑制剂治疗阿片耐受和成瘾已成为又一新的研究方向。而AQP1 是肾脏中发现的与水盐代谢关系非常密切的蛋白质水通道。 本实验应用吗啡依赖大鼠模型来研究吗啡依赖大鼠肾中AQP1 和eNOS 表达的变化,从而观察吗啡依赖对于肾损伤的关系。目的是探讨吗啡依赖大鼠肾脏病理学损害情况,肾内内皮型一氧化氮合酶基因表达的变化及水通道蛋白1 表达及基因表达情况,从而研究吗啡依赖大鼠肾损伤的情况。 通过建立吗啡依赖大鼠模型肾病理组织学的方法观察吗啡对肾引起的病理组织学影响。运用RT-PCR,southern Blot 的方法检测吗啡依赖大鼠肾内一氧化氮合酶基因表达的变化。通过病理组织学,免疫组织化学,RT-PCT 的方法观察吗啡鼠肾内水通道蛋白1 的蛋白和基因的表达情况。结果显示常规HE染色光镜下观察实验组大鼠所见肾小管有大小不等上皮细胞变性区和局灶性坏死区,部分上皮呈水肿和空泡样变性。与对照组相比,eNOS 基因转录产物在给药3 天时变化不明显,给药7 天时有增高趋势。停药3 天后肾内eNOSmRNA 表达明显增高。停药7 天后略有下降,但仍持续以较高水平。肾内AQP1 表达不受影响,未发现明显变化。 最后我们得出,吗啡依赖可以引起大鼠肾组织病理损伤,吗啡大鼠肾内eNOS 表达发生变化,AQP1 表达不受影响。前者可能为一种保护性反应。
【学位单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2005
【中图分类】：R749.6
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前言
内容提要和关键词
引言
材料与方法
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 主要仪器设备
        1.3 实验主要试剂
        1.4 主要实验溶液的配制
    2 实验方法
        2.1 动物模型的建立
        2.2 病理组织学检测
        2.3 eNOS 基因表达的检测期
        2.4 eNOS 基因产物的酶切鉴定
        2.5 Southern Blot
实验结果
    1、吗啡依赖大鼠模型的建立和体重变化
    2、吗啡大鼠模型肾病理及免疫组织化学结果观察
    3、肾组织总RNA提取分析
    4、eNOS mRNA 在各组织中的表达结果
    5、eNOS 表达产物的酶切鉴定结果
    6、肾脏eNOSmRNA 的表达变化
    7、吗啡依赖大鼠丘脑及肾中 eNOS mRNA 的表达变化
讨论
    1、动物模型的成功建立
    2、mRNA 的测定
    3、吗啡依赖模型肾组织病理改变
    4、吗啡依赖大鼠肾内eNOS 基因表达的变化
    5、吗啡依赖大鼠肾内 AQP-1 基因表达的变化
结论
参考文献
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致谢
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1 曹君利,曾因明,张励才,顾均,周文华,杨国栋;NO参与介导吗啡戒断大鼠脊髓神经元敏感化[J];生理学报;2001年01期

2 李银生,雷素英,唐军民,唐岩,李枫,邱学才;褪黑素对吗啡依赖小鼠肾损害的治疗作用[J];现代康复;2001年21期

3 王芳,郭晓红,杨耘,张晓冬,高倩,张肇玖,张正仙,徐贵丽,蒋家雄;海洛因与吗啡依赖恒河猴的病理组织学研究[J];中国药物依赖性杂志;1999年02期

4 郑大同,李述庭,高雁翎,陈舜年;新生鼠缺氧缺血性脑损伤组织一氧化氮合酶基因表达及作用[J];中华儿科杂志;2001年01期

5 吴婉芳;;新生儿缺氧缺血性脑病动物实验研究[J];中国实用儿科杂志;1995年02期

本文编号：2872843