CiRS-7在AD病理进程中作用机制的初步研究
发布时间:2021-01-31 08:32
阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种年龄相关的神经退行性疾病,其特征是认知和记忆功能逐渐丧失。环状RNA在调节基因表达中发挥重要作用,它们在中枢神经系统中高度富集。ciRS-7作为一种环状RNA,有报导它在AD病人脑中显著性下降,但其对AD的作用和机制目前尚不清楚。本研究采用qPCR技术检测了ciRs-7在AD模型细胞系N2a-sw和HEK293/tau、原代培养的神经元和12月龄三转基因AD模型小鼠(3×Tg-AD)中的表达情况,结果发现与其非AD的对照组相比较,AD组中ciRs-7的表达水平均降低。在3×Tg-AD模型小鼠脑中ciRs-7的表达量随着月龄的增加先增后降,说明ciRS-7与小鼠生长及AD形成过程有密切的联系。在N2a-sw细胞中过表达ciRS-7后,利用Western blot检测了?-淀粉样蛋白(A?)级联通路中关键蛋白APP、BACE1、Aβ1-42等的蛋白表达水平,发现它们均下调,说明在AD模型细胞中ciRS-7的上调可以抑制A?级联通路。为了进一步研究ciRS-7在N2a-sw细胞中的作用通路,将其过表达后进...
【文章来源】:深圳大学广东省
【文章页数】:71 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
环状RNA形成过程
序)获得短序列[63]。目前,微阵列和 RNA 测序(RNA-seq)两种方法已经成为当代转录组学的微阵列测量荧光标记的转录物(mRNA)与珠芯片上的核苷酸探针杂交,RN每个转录物的测序,随后与参考基因组比对。尽管成本更低和劳动力密集程度阵列现在已被 RNA-seq 大部分所取代。 选题意义与研究框架AD 是一种老年病,其发病率会随着年龄增加而增加,该病晚期时,病人会出记忆衰退,生活基本不能自理,甚至会导致死亡,给个人、家庭和社会造成严和社会问题。当前中国正快速步入老年化,老年人的数目大幅增加,AD 是我面对的问题。环状 RNA 是最近几年的研究热点,其在神经组织中富集;并且iRS-7 在 AD 病人脑中低表达,但其功能和作用机制仍不太清楚。本研究的目的iRS-7 在 AD 中的作用以及是否可作为药物靶点。
第二章 材料与方法2.1 实验材料2.1.1 细胞模型和动物模型小鼠神经瘤母细胞 N2a 和人源胚胎肾细胞 HEK293 均购自中科院上海细胞-sw 细胞是稳转 APP695swedish 突变基因的 Neuro-2a 细胞,HEK293/tau 是稳41 的人胚肾 293 细胞,两种 AD 模型细胞系均为本实验室储存。实验所用的 3×TgAD 小鼠及野生型小鼠均购于美国 Jax 实验室。2.1.2 实验质粒pcDNA3.1(+) ZKSCAN1 MCS-ciRS-7 Exon 和 pcDNA3.1(+) ZKSCAN1 MCStor 的穿刺菌均购自于 addgene。
本文编号:3010536
【文章来源】:深圳大学广东省
【文章页数】:71 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
环状RNA形成过程
序)获得短序列[63]。目前,微阵列和 RNA 测序(RNA-seq)两种方法已经成为当代转录组学的微阵列测量荧光标记的转录物(mRNA)与珠芯片上的核苷酸探针杂交,RN每个转录物的测序,随后与参考基因组比对。尽管成本更低和劳动力密集程度阵列现在已被 RNA-seq 大部分所取代。 选题意义与研究框架AD 是一种老年病,其发病率会随着年龄增加而增加,该病晚期时,病人会出记忆衰退,生活基本不能自理,甚至会导致死亡,给个人、家庭和社会造成严和社会问题。当前中国正快速步入老年化,老年人的数目大幅增加,AD 是我面对的问题。环状 RNA 是最近几年的研究热点,其在神经组织中富集;并且iRS-7 在 AD 病人脑中低表达,但其功能和作用机制仍不太清楚。本研究的目的iRS-7 在 AD 中的作用以及是否可作为药物靶点。
第二章 材料与方法2.1 实验材料2.1.1 细胞模型和动物模型小鼠神经瘤母细胞 N2a 和人源胚胎肾细胞 HEK293 均购自中科院上海细胞-sw 细胞是稳转 APP695swedish 突变基因的 Neuro-2a 细胞,HEK293/tau 是稳41 的人胚肾 293 细胞,两种 AD 模型细胞系均为本实验室储存。实验所用的 3×TgAD 小鼠及野生型小鼠均购于美国 Jax 实验室。2.1.2 实验质粒pcDNA3.1(+) ZKSCAN1 MCS-ciRS-7 Exon 和 pcDNA3.1(+) ZKSCAN1 MCStor 的穿刺菌均购自于 addgene。
本文编号:3010536
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