抗β淀粉样蛋白人源性单链抗体表达、纯化流程的建立及其抗原表位鉴定

发布时间：2021-05-24 18:53

　　β淀粉样蛋白（Amyloidβ，Aβ）是比较公认的阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease，AD）的原发性致病因子，Aβ在脑内的异常聚合和沉积是AD发病机制的中心环节。靶向Aβ的被动免疫治疗已在AD模型动物上取得显著效果，但抗体的鼠源性限制了其在人体的应用。研制合适的人源化抗体是开展人体Aβ免疫疗法的首要条件。利用噬菌体抗体库技术获得的单链抗体为全人源性，更适用于人体。本课题组之前已经以Aβ_1-40为靶标，筛选噬菌体单链抗体库获得了抗Aβ_1-40单链抗体E3（single chain variable fragment E3，E3 scfv）的基因片段，并对单链抗体E3初步进行了体外实验。本研究在固定诱导表达时间和诱导表达温度的条件下，采用不同终浓度的IPTG进行诱导表达，通过SDS-PAGE分析全菌目的蛋白质E3 scfv的表达水平，确定了E3 scfv在20℃诱导表达18 h时，所需诱导剂IPTG的最佳浓度为0.1 mM；纯化时，对样品依次用含咪唑10 mM、20 mM、30 mM、40 mM、50 mM、60 mM、70 m... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
第一章 引言
第二章 材料和方法
第三章 结果
第四章 分析和讨论
小结
参考文献
致谢
综述



本文编号：3204686