过表达脑红蛋白通过激活PI3K/Akt信号通路防治AD的体外研究

发布时间：2021-07-17 16:16

　　目的:探索过表达脑红蛋白（neuroglobin,NGB）对转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞的神经保护作用及机制。方法:成功构建过表达NGB的质粒p EGFP-NGB并转染入已预先转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞,MTT法检测过表达NGB对该细胞存活率的影响;JC-1法检测其对细胞线粒体膜电位的影响;流式细胞术检测过表达NGB对细胞凋亡的影响;Western blotting法检测其对细胞中p-Akt、Akt和caspase-3/9表达的影响;ELISA法检测其对细胞内Aβ42生成的影响。结果:MTT结果显示,与对照组和空质粒组比较,转染NGB后,p APPswe-SH-SY5Y细胞的存活率明显提高,差异有统计学意义（P<0.05）。JC-1染色结果显示过表达NGB能够明显抑制转染p APPswe对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的降低作用（P<0.05）。流式细胞术结果显示过表达NGB能够抑制早、晚期细胞的凋亡。而Western blotting显示过表达NGB不仅能抑制细胞内caspase-3和caspase-9蛋白水平的表达,而且还能够促进细胞内p-... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2014,30(12)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材料和方法
    1 细胞及质粒
    2 主要试剂
    3 主要实验方法
        3.1 细胞培养
        3.2 p EGFP-NGB细胞转染
        3.3 MTT法检测细胞存活率
        3.4 线粒体膜电位的检测
        3.5 流式细胞仪检测
        3.6 Western blotting
        3.7 ELISA法检测Aβ42的生成
    4 统计学处理
结果
    1过表达NGB提高转染p APPswe的SH-SY5Y细胞的存活率
    2过表达NGB提高转染p APPswe的SH-SY5Y细胞的线粒体膜电位
    3过表达NGB减少转染p APPswe的SH-SY5Y细胞的凋亡
    4 过表达NGB通过激活PI3K/Akt通路抑制转染pA PPswe的SH-SY5Y细胞内caspase-3和caspase-9 蛋白的表达
    5过表达NGB明显降低Aβ42生成
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]间歇性低压缺氧预处理对大鼠全脑缺血/再灌注海马CA1区Ngb和Bcl-2蛋白表达的影响[J]. 刘永年,俞科贤,马祁生,吴穹.  中国病理生理杂志. 2013(12)



本文编号：3288515