可卡因—安非他明调节转录肽抗体对抗吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱

发布时间：2021-07-17 09:16

　　目的:研究可卡因—安非他明调节转录肽（cocaine-amphetamine-regulated transcript,CART）抗体在吗啡依赖和复吸中的作用。方法:用分子生物学的技术克隆将CART_55-102序列克隆到pGEX-4T3原核表达载体多克隆位点,构建GST—CART_55-102融合表达载体。在原核细胞中表达并纯化融合蛋白GST—CART_55-102,免疫学方法制备CART_55-102多克隆抗体,用亲和层析技术纯化CART_55-102抗体,蛋白印记技术鉴定亲和层析纯化抗体的特异性,用行为学方法分别观察纯化后兔源性CART_55-102抗体对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱的影响。结果:GST—CART_55-102在大肠杆菌中能以上清的形式大量表达,并能用GST亲和层析方法获得纯度大于90%的GST—CART_55-102。商业化CART单抗可识别该融合蛋白,表明该融合蛋白具有CART单抗所识别的抗原表位。We... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

pGEX一4T3一CART55.:

123456图2.PCR法扩增ACRTos一102psk一CART克隆上扩增出CART55一:。:片段。第2泳道:NDAMarker(DL2000)。7片段第1，2，3，

pGEx一4T3一以RT

【参考文献】：
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本文编号：3287887