miR-142通过FMRP介导调控APP/PS1小鼠海马神经元PSD95和Synapsin Ⅰ表达影响学习记忆能力

发布时间：2021-11-03 02:38

　　目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种中枢神经系统退行性疾病,以记忆减退、进行性认知功能障碍、人格变性为主要表现。AD是继心血管病、脑血管病、肿瘤之后,引起老年人死亡的第四大病因,是老年人认知障碍最常见的原因,严重影响患者的生活质量。但是,AD的发病机制尚未研究清楚,也没有可以治愈的药物。目前认为其发病可能与Aβ（β—amyloid peptide,Aβ）沉积、Tau蛋白过度磷酸化、氧化应激、炎症反应等相关,其中,Aβ在脑内的沉淀堆积可能是导致AD的根本原因。近年来,一些研究表明AD患者脑中有部分的miRNA表达的改变,并证明miRNA的表达失调可能在AD相关认知损害中起着重要的作用。有研究发现miR-142在AD中表达改变,miR-142前体经加工可产生成熟的两个miRNA,分别为miR-142-5p和miR-142-3p,成熟的miR-142在物种间具有高度的保守性,在多种肿瘤、免疫相关疾病和胚胎干细胞中均发挥了重要作用。此外,近年来研究表明,miR-142与衰老相关,miR-142在10月龄APP转基因小鼠脑中和AD患者海马中表达显著升高。另有研... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

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【部分图文】：

PS1基因鉴定结果

中国医科大学硕士学位论文13图1PS1基因鉴定结果M表示DNAmarker条带，1-10为小鼠编号3.2Morris水迷宫行为学检测3.2.1定向巡航实验：实验的前5天，定向巡航实验结果表明：每个组的实验动物的逃避轨迹都有所不同（图2A）。各组实验动物的逃避潜伏期都会随着训练时间的进行而逐渐缩短。AD组小鼠其逃避潜伏期显著长于Control组和AD+sh-miR组（P<0.05），AD组与miR-NC组两组间无显著差异（图2B）。此结果表明miR-142基因沉默显著改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力缺陷。图2Morris水迷宫实验——定向巡航实验A：定位巡航实验轨迹图；B：定位巡航实验5天逃避潜伏期的比较：*P<0.05，**p<0.01，AD组vs.Control组；#p<0.05sh-miR组vs.AD组。（n=6）。

中国医科大学硕士学位论文143.2.2空间探索实验第6天撤去平台，进行探索性实验，结果表明：与Control组相比，AD组于平台所在目标象限的逗留时间占总时间的百分比显著减少（P<0.05）；与AD组相比，sh-miR组小鼠在目标象限逗留时间占总时间的百分比显著增加（P<0.05）；AD组与sh-miR-NC组两组小鼠在目标象限逗留时间百分比无显著差异（图3）。这些结果表明：miR-142基因沉默显著改善小鼠的空间记忆缺陷。图3Morris水迷宫实验——空间探索实验各组动物在目标象限逗留的时间占比，*p<0.05。数值以均数±标准差表示（n=6）。3.3基因转染结果为了验证sh-miR-142是否成功感染到小鼠脑内以及它的转染效率，侧脑室注射慢病毒14天后，我们选取小鼠海马组织制成冰冻切片，在正置荧光显微镜下观察到GFP标记物，同时将未进行侧脑室注射的对照组小鼠作对照（图4）：LV-sh-miR-142control图4sh-miR-142转染14天后在APP/PS1小鼠海马组织sh-miR-142GFP表达情况3.4各组小鼠海马中FMRP的表达情况为了探讨miR-142基因沉默是否通过结合FMRP改善AD小鼠的认知缺陷，我们通过免疫荧光双标、WesternBlot方法检测各组小鼠海马中FMRP的表达水

【参考文献】：
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本文编号：3472874