跑台运动对TgAPP/PS1小鼠海马线粒体自噬的影响研究

发布时间：2021-11-17 00:15

　　背景:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种常见的神经退行性疾病,脑内β-淀粉样蛋白（β-amyloid peptides,Aβ）的神经毒性被认为是AD发病的主要诱因。研究表明,细胞内的Aβ可进入线粒体内,损害线粒体功能,抑制线粒体自噬过程,继而减少神经元内受损线粒体清除,并增加Aβ聚集,提示脑线粒体自噬受损是诱发AD病理症状的重要原因。目前,大量研究已证明运动可减少脑内Aβ沉积,改善小鼠的学习记忆能力,对预防与缓解AD具有良好的作用,但其具体分子机制尚未完全阐明。近期研究发现,运动可通过提高野生型健康小鼠海马线粒体自噬活性起到促认知效应,这提示线粒体自噬可能是运动改善AD的重要机制。然而目前,关于运动预防和改善AD的机制是否涉及海马线粒体自噬活性变化的研究鲜见,需深入探讨。目的:本文拟通过采用3月龄APP/PS1转基因小鼠进行12周的跑台运动,确认运动对AD小鼠学习记忆能力的影响,观察运动是否可减少AD小鼠海马线粒体内Aβ聚集及改善线粒体功能障碍,明确运动改善AD的机制是否涉及海马线粒体自噬活性变化,并初步探讨PINK1/Parkin通路及溶酶体功能在运动... 

【文章来源】：华东师范大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
论文摘要
abstract
一、文献综述
    1 前言
    2 AD与脑线粒体自噬障碍
        2.1 Aβ导致脑线粒体功能障碍机制
            2.1.1 AD脑内Aβ产生的机制
            2.1.2 Aβ导致线粒体功能受损的机制
        2.2 AD脑线粒体功能障碍
        2.3 AD脑内的线粒体自噬障碍
            2.3.1 线粒体自噬概述
            2.3.2 PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬
            2.3.3 溶酶体在线粒体自噬/细胞自噬中的作用
            2.3.4 AD脑内的线粒体自噬障碍的机制
            2.3.5 AD脑内线粒体自噬活性提高可减少Aβ沉积
        2.4 运动预防和改善AD的国内外研究现状
            2.4.1 运动可减少AD脑内Aβ沉积
            2.4.2 运动可调控脑内线粒体自噬活性
        2.5 小结与展望
二、实验研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 实验动物分组
        2.3 运动方案
        2.4 主要实验试剂及仪器
        2.5 体重
        2.6 Morris水迷宫实验
        2.7 取材
        2.8 免疫荧光检测海马线粒体(COX IV标记)分别与Aβ、自噬体(LC3 标记)的共定位面积
        2.9 海马线粒体制备
        2.10 Real time-PCR
        2.11 Western Blot
        2.12 数据统计
    3 研究结果
        3.1 小鼠体重监测
        3.2 Morris水迷宫实验结果比较
            3.2.1 定位航行实验结果
            3.2.2 空间探索实验结果
        3.3 运动对小鼠海马线粒体内Aβ聚集及线粒体功能的影响
            3.3.1 运动对小鼠海马Aβ与线粒体共定位面积的影响
            3.3.2 运动对小鼠海马线粒体内Aβ蛋白表达水平的影响
            3.3.3 运动对小鼠海马线粒体功能相关调控蛋白的影响
        3.4 运动对小鼠海马线粒体自噬活性的影响
            3.4.1 运动对小鼠海马线粒体与自噬体共定位面积的影响
            3.4.2 运动对小鼠海马线粒体自噬活性相关蛋白表达的影响
        3.5 运动对小鼠海马内PINK1/Parkin通路的影响
        3.6 运动对小鼠海马溶酶体功能的影响
            3.6.1 运动对小鼠海马溶酶体相关蛋白Cathepsin D、Rab7mRNA表达水平的影响
            3.6.2 运动对小鼠海马溶酶体相关蛋白Cathepsin D、Rab7蛋白表达水平的影响
    4 分析与讨论
        4.1 运动可延缓APP/PS1小鼠学习记忆能力的下降
        4.2 运动可减少APP/PS1小鼠海马线粒体内Aβ聚集
        4.3 运动可改善APP/PS1小鼠海马线粒体功能障碍
        4.4 运动可提高APP/PS1小鼠的线粒体自噬活性
        4.5 运动可增强海马线粒体募集Parkin的能力促进线粒体自噬启动
        4.6 运动可促进APP/PS1小鼠海马内自噬体与溶酶体的融合
    5 结论
三、创新与不足
四、研究展望
参考文献
附录
    英文缩略表
    动物实验伦理审查表
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]线粒体自噬在阿尔茨海默病中的研究进展[J]. 黄怡,杨秋悦,陈婷,陈畅,钟琦,张宗泽.  国际精神病学杂志. 2018(06)
[2]溶酶体水解酶Cathepsin D的细胞生物学功能[J]. 刘怿君,段树民.  蚌埠医学院学报. 2018(10)
[3]维持自噬稳态:阿尔茨海默病的防治新策略[J]. 龙志敏,贺桂琼.  现代医药卫生. 2017(18)
[4]APP/PS1双转基因AD传代小鼠的基因型鉴定及其行为学分析[J]. 武强,李露斯,范文辉,黎红华,崔敏,吴非,徐志鹏,濮捷,杨梅.  卒中与神经疾病. 2009(05)



本文编号：3499844