硫化氢对同型半胱氨酸损害SD大鼠学习记忆能力的改善作用及其机制

发布时间：2017-05-09 10:01

  本文关键词：硫化氢对同型半胱氨酸损害SD大鼠学习记忆能力的改善作用及其机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：【研究背景与目的】 在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)病人脑组织中，胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-bata-synthase, CBS)的内源性激动剂S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine, SAM)水平降低，同时同型半胱氨酸(Homocysteine, Hcy)水平升高，硫化氢(Hydrogen sulfide， H_2S)水平降低。高Hcy血症(Hyperhomocysteinemia, Hhcy)已成为AD一个重要的、独立的危险因素，，而硫化氢(Hydrogen sulfide, H_2S)近年来被认为是一种新型的气体神经调质，对中枢神经系统具有保护作用，并可调节突触的可塑性，增强记忆能力。我们研究小组的前期工作表明：H_2S对Hcy损伤PC12细胞具有拮抗作用。因此我们推测：H_2S对Hcy损伤学习记忆和认知功能具有拮抗作用。 为此，本实验以SD大鼠侧脑室注射Hcy为Hcy神经毒性的动物模型，探讨Hcy对SD大鼠脑组织内内源性H_2S生成的影以及H_2S对Hcy损害SD大鼠学习记忆及认知功能的影响及其机制。 【方法】 采用大鼠脑立体定位仪对SD大鼠行单侧侧脑室埋管，微量注射器对大鼠侧脑室注射Hcy，腹腔注射NaHS；Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力，新物体识别实验观察大鼠的认知功能；亚甲基蓝分光光度计法分别检测脑组织H_2S的生成及CBS活性，Western blotting检测BDNF及CBS蛋白的表达。 【结果】 1.同型半胱氨酸损害大鼠学习记忆和认知功能及其机制 我们采用对大鼠侧脑室微注射4μL不同浓度的Hcy，连续7天以建立AD动物模型，采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力，异物体识别实验分别检测大鼠的和认知功能。Morris水迷宫定位航行实验结果显示Hcy (0.6,2.0μmol)能浓度依赖性地使大鼠寻找平台的潜伏期显著延长，并且使其游泳路线曲折、复杂；水迷宫空间搜索实验结果显示Hcy (0.6,2.0μmol)浓度依赖性地使大鼠过原平台的次数减少并能减少大鼠在中环游泳时间比和目标象限时间比；新物体识别实验显示不同浓度的Hcy(0.2,0.6,2.0μmol)能浓度依赖性地使SD大鼠的偏好指数降低。上述结果提示：同型半胱氨酸对大鼠的学习记忆能力和认知功能具有损害作用。 亚甲基蓝分光光度计法检测大鼠脑组织内H_2S的含量结果显示Hcy (0.2,0.6,2.0μmol)可浓度依赖性地降低大鼠脑内H_2S的生成，并能抑制CBS合成H_2S的活性；对大鼠脑组织行Western blotting检测CBS表达，结果显示Hcy (0.2,0.6,2.0μmol)能浓度依赖性地降低大鼠海马CBS蛋白水平；表明Hcy对大鼠学习记忆和认知功能的损害作用与其抑制内源性H_2S的生成有关。 取大鼠海马组织行Western blotting检测BDNF蛋白表达水平，结果显示Hcy(0.2,0.6,2.0μmol)能浓度依赖性地抑制大鼠海马组织BDNF蛋白的表达；表明Hcy损伤大鼠学习记忆和认知功能可能与其抑制大鼠海马组织中BDNF蛋白的表达水平有关。 2.硫化氢能拮抗同型半胱氨酸损伤大鼠学习记忆与认知功能 通过予大鼠腹腔注射NaHS作为外源性H_2S的供体，Morris水迷宫定位航行实验结果显示，NaHS (1.68,3.36mg/kg)能逆转Hcy (0.6μmol)处理的大鼠寻找平台的潜伏期、并改善大鼠的游泳路线；空间搜索实验NaHS (1.68,3.36mg/kg)能逆转Hcy(0.6μmol)组大鼠越过平台次数，并能增加大鼠在中环的游泳时间比和目标象限时间比；新物体识别实验结果提示，NaHS (1.68,3.36mg/kg)能明显改善Hcy (0.6μmol)组大鼠的偏好指数。上述结果提示H_2S对同型半胱氨酸损伤大鼠学习记忆和认知功能具有改善作用。 对BDNF蛋白表达的实验显示NaHS (1.683.36mg/kg)显著逆转Hcy (0.6μmol)对海马BDNF表达的抑制作用；提示，H_2S改善同型半胱氨酸损伤SD大鼠的学习记忆和认知功能可能与其上调BDNF蛋白的表达有关。 【结论】 1. Hcy损伤大鼠的学习记忆和认知功能可能与其抑制脑组织CBS表达及活性、内源性H_2S的生成以及海马BDNF蛋白表达有关。 2. H_2S对Hcy损伤大鼠学习记忆和认知功能具有改善作用，其机理可能与其上调海马BDNF的表达有关。
【关键词】：同型半胱氨酸 硫化氢 脑源性神经营养因子 学习记忆 认知功能
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 缩略词6-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-18
• 材料与方法18-26
• 1. 主要试剂和仪器18-20
• 2. 试剂和药品的配制20-22
• 3. 实验方法22-25
• 4. 统计分析25-26
• 结果26-36
• 1. Hcy 对 SD 大鼠学习记忆和认知功能的损害作用及其机制26-31
• 2. H2S 改善 Hcy 损伤 SD 大鼠学习记忆和认知功能及机制31-36
• 讨论36-40
• 结论40-41
• 参考文献41-47
• 综述47-55
• 参考文献52-55
• 硕士期间发表论文55-56
• 致谢56

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵广珍;曹霞;;高同型半胱氨酸在认知障碍中的作用[J];国际神经病学神经外科学杂志;2007年03期

2 杨昊翔;尹力勇;;高同型半胱氨酸血症与老年人轻度认知功能障碍相关性研究[J];河北医药;2011年11期

3 张会军;白宏英;张建平;孔羽;;轻度认知功能障碍与血浆同型半胱氨酸水平的相关性研究[J];中国实用神经疾病杂志;2009年23期

4 周靖;董文敏;崔德华;;同型半胱氨酸与脑疾病[J];神经疾病与精神卫生;2007年05期

5 江琦;瞿正万;陈美娣;王豪;朱丽娜;钱丽娜;杨振东;;阿尔茨海默病与血管性痴呆患者血浆同型半胱氨酸与超氧化物歧化酶的比较[J];上海精神医学;2008年03期

6 杨昊翔;尹立勇;崔志杰;;高同型半胱氨酸血症与老年人认知功能障碍相关性研究[J];临床荟萃;2011年12期

7 李红伟;李焰生;;血浆同型半胱氨酸与认知功能[J];国外医学(脑血管疾病分册);2005年09期

8 万里姝;任艳;;同型半胱氨酸的神经毒性机制[J];国际脑血管病杂志;2007年12期

9 卢万俊;仇圣刚;刘静;;血浆同型半胱氨酸和血清神经元特异性烯醇化酶对轻度血管性认知障碍的预测价值[J];脑与神经疾病杂志;2013年02期

10 文敏;周波;康朝胜;臧贵勇;王景传;余资江;;大鼠海马CA3区突触素的增龄性变化[J];山东大学学报(医学版);2008年03期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 江河;王宪;;高同型半胱氨酸上调醛糖还原酶表达的病理生理意义[A];中国生理学会论文汇编2005年第三期[C];2005年

2 魏华春;张瑞;李爱秀;魏冬青;;同半胱氨酸腺苷水解酶抑制剂的虚拟筛选和设计[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集（上册）[C];2006年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 胡淑敏;一氧化氮合酶与神经管畸形关系的研究[D];中国医科大学;2007年

2 毛广运;高血压合并高同型半胱氨酸血症的分子流行病学和依那普利叶酸片降糖疗效的多中心、随机双盲、平行对照临床试验研究[D];安徽医科大学;2008年

3 侯倩倩;几类重要的酶催化反应的机理研究[D];山东大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 赵广珍;血浆同型半胱氨酸与脑小血管病变患者认知障碍的关系[D];泰山医学院;2007年

2 群森;高血同型半胱氨酸与血管性认知功能障碍的研究[D];安徽医科大学;2010年

3 余招平;脑小血管病的轻度认知损害与同型半胱氨酸的相关性研究[D];安徽医科大学;2011年

4 杨阳;先天性HCMV感染大鼠海马区突触素Ⅰ表达的研究[D];安徽医科大学;2011年

5 陈容前;西地那非-H_2S释放剂（ACS6）对同型半胱氨酸损伤PC12细胞的拮抗作用及机制[D];南华大学;2011年

6 艾力克木·阿布都瓦克;新疆维、汉两民族老年人轻度认功能障碍与血浆同型半胱氨酸的相关性研究[D];新疆医科大学;2011年

7 王菁婧;高同型半胱氨酸血症个体化治疗的临床研究[D];郑州大学;2011年

8 孙鹏;盐酸多奈哌齐对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经细胞凋亡及突触素、NMDAR-2B表达的影响[D];河北联合大学;2011年

9 范新萍;同型半胱氨酸与2型糖尿病及其并发症关系的研究[D];天津医科大学;2003年

10 徐晓（龙天）;风湿性疾病中高同型半胱氨酸血症的研究[D];山西医科大学;2003年

  本文关键词：硫化氢对同型半胱氨酸损害SD大鼠学习记忆能力的改善作用及其机制，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：352256