老年性痴呆（阿尔茨海默病）β淀粉样蛋白人源抗体的体外筛选和表达

发布时间：2022-07-15 15:20

　　阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD），俗称老年性痴呆（senile dementia），是一种和老化相关的神经退行性疾病。随着我国人口在上世纪末提前进入老龄化，老年性痴呆已经继心脏病、肿瘤和脑卒中之后成为第四位的死亡原因。目前，对该病的诊断和治疗没有理想的药物。 本研究利用Fmoc法合成的老年性痴呆的致病抗原-β淀粉样蛋白之一Aβ40多肽及其氨基端第一到第十六个氨基酸残基片段Aβ16作为抗原，从一个来自于人类抗体可变区基因构建的单链抗体噬菌体展示的表达文库中筛选老年性痴呆抗体。经过5轮的扩增-吸附-洗脱，分别对Aβ16、Aβ40特异的噬菌体抗体进行了富集。从随机挑选的53和55个克隆中发现了8个和33个侯选克隆。其中，针对Aβ40的10个侯选克隆经过对抗原Aβ40的竞争性ELISA测试，发现抗原Aβ40对它们的抑制率达到50％以上，确定为阳性克隆。另外，Aβ16能对其中5个阳性克隆的抗原结合活力的抑制率达到50％以上，确认抗体对抗原的结合位于氨基端第一到第十六个氨基酸残基表位上。 通过设计特异的引物，应用PCR方法，将其中4个阳性克隆的单链抗体基因从... 

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前言
实验第一部分：β淀粉样蛋白的单链抗体的筛选和鉴定
实验第二部分：β淀粉样蛋白的单链抗体基因测序和氨基酸序列确定
实验第三部分：β淀粉样蛋白单链抗体在原核生物大肠杆菌中的表达
实验第四部分：β淀粉样蛋白单链抗体的纯化
实验第五部分：β淀粉样蛋白单链抗体在真核生物酵母中的表达
实验第六部分：β淀粉样蛋白人单克隆抗体在昆虫细胞的表达
论文参考文献
综述
附录
致谢



本文编号：3662303