模拟缺血再灌注诱导神经元凋亡与MT/NAC抗凋亡机理的研究

发布时间：2023-05-10 18:10

　　本研究通过建立神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)体外模拟缺血再灌(imitative ischemia-reperfusion)模型,探讨神经细胞凋亡的途径及褪黑素(melatonin,MT)和N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)抗氧化、抗凋亡的作用机制,为缺血再灌注诱导脑神经元凋亡的基础性研究和临床有效防治老年(血管)性痴呆(Vascular dementia,VD)提供新的理论依据。 体外常规培养人神经母细胞瘤细胞株SHSY5Y,然后模拟缺血再灌注培养(先缺糖缺氧,后正常培养)建立细胞模型;实验分正常对照组、缺氧再灌组及MT/NAC药物组;琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪和透射电镜检测细胞凋亡情况;MTT法检测细胞生存活力;荧光比色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生;HLPC检测兴奋性神经递质谷氨酸(Glutamate,Glu)的释放;分光光度法检测Caspase-3活性和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性;western blotting及ELISA法检测细胞色素C(cytochrom...

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【学位级别】：博士

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中文摘要
英文摘要
前言
参考文献
材料方法
    一、主要试剂和材料
    二、主要仪器和器材
    三、方法
结果
    1、琼脂糖凝胶电泳对凋亡神经元检测及MT/NAC的保护作用
    2、流式细胞仪对凋亡神经元检测及MT/NAC的保护作用
    3、透射电镜对凋亡细胞的检测
    4、模拟缺血再灌注致细胞生存能力下降及MT/NAC的保护作用
    5、模拟缺血再灌注对乳酸脱氢酶影响及MT/NAC的保护作用
    6、缺血再灌注诱导神经细胞释放Glu类神经递质及MT/NAC的保护作用
    7、模拟缺血再灌注诱导细胞内ROS升高及MT/NAC的抗氧化作用
    8、模拟缺血再灌注诱导细胞色素C释放及MT/NAC的抑制作用
    9、模拟缺血再灌注诱导Csapase-3的释放及MT/NAC的抑制作用
    10、模拟缺血再灌注诱导线粒体跨膜电位的改变及MT/NAC的稳定作用
讨论
小结
参考文献
综述
    一、缺血再灌注诱导细胞凋亡的线粒体途径
    二、线粒体途径介导细胞凋亡的影响因素
参考文献
发表论文
致谢



本文编号：3813252