miR-369-3p对缺氧诱导海马神经元细胞增殖、凋亡的影响及其机制

发布时间：2024-03-06 03:53

　　目的探讨miR-369-3p对缺氧诱导的海马神经元细胞(Hhn)增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将Hhn细胞置于持续充入95%N₂+5%CO₂的密闭培养箱中进行缺氧处理48 h (缺氧组),正常培养的细胞作为对照组。将miR-NC、miR-369-3p、anti-miR-NC、anti-miR-369-3p转染至Hhn细胞中,分别记为miR-NC组、miR-369-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-369-3p组;将anti-miR-NC、anti-miR-369-3p、pcDNA3.1、pcDNA3.1-NAMPT分别转染至Hhn细胞中再进行缺氧处理,分别记为缺氧+anti-miR-NC组、缺氧+anti-miR-369-3p组、缺氧+pcDNA3.1组、缺氧+pcDNA3.1-NAMPT组;将anti-miR-369-3p质粒分别与si-NC、si-NAMPT共转染至Hhn细胞中再进行缺氧处理,分别记为缺氧+anti-miR-369-3p+si-NC组、缺氧+anti-miR-369-3p+si-NAMPT组;转染均采...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与试剂
    1.2 方法
        1.2.1 海马神经元细胞Hhn分离培养与鉴定
        1.2.2 细胞缺氧处理与分组
        1.2.3 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测miR-369-3p表达水平
        1.2.4 流式细胞术检测细胞凋亡
        1.2.5 蛋白质印迹(Western blot)检测CyclinD1、P21、Bcl-2、Bax和NAMPT蛋白表达水平
        1.2.6 MTT检测细胞增殖活性
        1.2.7 SOD和MDA试剂盒分别检测SOD活性和MDA含量
        1.2.8 双荧光素酶报告
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 miR-369-3p、NAMPT在缺氧诱导的细胞Hhn中的表达
    2.2 抑制miR-369-3p对缺氧诱导的细胞Hhn增殖、凋亡及SOD、MDA的影响
    2.3 miR-369-3p靶向、调控NAMPT的表达
    2.4 过表达NAMPT对缺氧诱导的细胞Hhn增殖、凋亡及SOD、MDA表达的影响
    2.5 抑制NAMPT表达能逆转抑制miR-369-3p对缺氧诱导的细胞Hhn增殖、凋亡及SOD、MDA表达的影响
3 讨论



本文编号：3920511