Aβ 1-42 对SH-SY5Y细胞T514位点磷酸化CRMP2表达的影响

发布时间：2025-02-09 18:43

　　 目的探讨β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)对成神经瘤细胞SH-SY5Y轴突生长状态、细胞微管结构及T514位点磷酸化脑衰蛋白反应调节蛋白2(CRMP2)表达的影响。方法用全反式维甲酸诱导SH-SY5Y细胞,细胞外给予聚集态Aβ1-42致细胞损伤;用MTT法检测细胞存活率;用细胞化学法测量细胞轴突长度;免疫荧光法观察细胞微管结构及T514位点磷酸化CRMP2的分布;Westen blot分析T514位点磷酸化CRMP2在细胞内的表达。结果 0.1与1μmol/L聚集态Aβ1-42使诱导后SH-SY5Y细胞存活率显著减低(P<0.01);以1μmol/L Aβ1-42处理后,细胞轴突长度缩短(P<0.05)。0.1和1μmol/L Aβ1-42处理后细胞微管结构模糊,T514位点磷酸化CRMP2在细胞内荧光分布面积扩大(P<0.05),强度增加(P<0.01);用0.1和1μmol/L聚集态Aβ1-42处理后细胞内T514位点磷酸化CRMP2表达量显著增加(P<0.01)。结论 Aβ1-42可增加SH-SY5Y细胞内T514位点磷酸化CRMP2的表达,损害微...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 药品与试剂
    1.2 Aβ1-42寡聚体的制备
    1.3 细胞培养和处理
    1.4 MTT法测细胞存活率
    1.5 轴突生长状态的测量
    1.6 直接免疫荧光与间接免疫荧光双标记染色
    1.7 Westen blot检测T514位点磷酸化CRMP2的表达
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 Aβ1-42对细胞存活率的影响
    2.2 Aβ1-42对细胞轴突生长状态的影响
    2.3 免疫荧光分析Aβ1-42对细胞微管结构及细胞磷酸化CRMP2表达的影响
    2.4 Westen blot分析细胞内T514位点磷酸化CRMP2的表达
3 讨论



本文编号：4032696