不同链长饱和脂肪酸在老年大脑中的变化及对SH-SY5Y细胞Aβ代谢的影响

发布时间：2017-08-03 14:31

  本文关键词：不同链长饱和脂肪酸在老年大脑中的变化及对SH-SY5Y细胞Aβ代谢的影响

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【摘要】：背景：近年研究显示,食物脂肪酸构成比例、脑和血清脂肪酸组成及含量与老年认知能力密切相关,但是目前对衰老大脑中饱和脂肪酸的组成特征尚无明确一致认识,亟待研究阐明。阿尔茨海默病(AD)是老年性痴呆最常见的类型,β-淀粉样蛋白(Aβ)是AD发病机制的关键因子。研究显示高饱和脂肪饮食是AD的危险因素,但是碳链长度不同的饱和脂肪酸对Aβ代谢是否有不同作用,目前国内外尚未见到报道。目的：研究不同碳链长度饱和脂肪酸在老年大脑的变化以及对SH-SY5Y细胞A β代谢的影响,以期探明不同类型饱和脂肪酸在脑老化及AD发生机制中的作用。方法：第一部分：采用22月龄和3月龄雄性SD大鼠作为实验对象,应用气相色谱方法分析老年和青年大鼠大脑皮质饱和脂肪酸的组成和含量。第二部分：将SH-SY5Y细胞随机分为4组,对照组(Control组)、C16：0组、C20：0组、C26：0组。细胞培养12h后处理细胞。先用MTT法、LDH细胞毒性实验找出合适的给药浓度范围。用荧光倒置显微镜观察细胞形态,用ELISA法测定细胞培养液中Aβ含量,用半定量RT-PCR法测定细胞APP、ADAM10、BACE1、PS1、NEP等Aβ代谢相关因子的基因表达,荧光探针DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果：第一部分实验结果：气相色谱分析结果显示,老年组和青年组大脑皮质均含有16种脂肪酸。用峰面积归一化法对脂肪酸进行定量。结果显示,与青年组相比,老年组饱和脂肪酸C18：0含量明显降低,饱和脂肪酸C20：0、C24：0水平均明显升高,C22：0水平也有升高趋势。第二部分实验结果：1.MTT实验、细胞形态学观察、LDH细胞毒性实验显示,本实验应选择10μmol/L、 15μmol/L两个相当于生理浓度的条件进行3种脂肪酸C16:0、C20:0、C26:0对SH-SY5Y细胞Ap代谢的研究。2.Aβ40检测结果显示,在10μmol/L浓度下,C26：0组Aβ40分泌量较Control组显著增加,C20：0组Aβ40分泌量较Control组有升高趋势,在15μmol/L浓度下,C26：0组Aβ40分泌量较Control组有升高趋势。3. APP mRNA相对表达量：15μmol/L浓度下,C26：0组较Control组、C20：0组均显著增加。ADAM10相对表达量：10μmol/L浓度下,C16：0组较Control组显著降低,同时较C20：0组、C26：0组也显著降低。BACE1目对表达量：10μmol/L浓度下,C26：0组较Control组、C16：0组均显著升高,同时较C20：0组也有升高趋势。PSl相对表达量：10μmol/L浓度下,C16：0组、C20：0组、C26：0组的PS1 mRNA相对量较Control组均显著升高,15μmol/L浓度下,C20：0组显著高于Control组和C26：0组NEP相对表达量：10μmol/L、15μmol/L浓度条件下,各组间NEP mRNA相对量的差异均无统计学意义。4.细胞活性氧水平检测结果显示,在10μmol/L、15μmol/L两个浓度下,C20：0组、C26：0组ROS水平较Control组、C16：0组均显著升高,C26：0组ROS水平较C20：0组也显著升高。结论1、老年大鼠大脑皮质饱和脂肪酸组成不同于青年大鼠。老年大脑C18：0减少,而较长碳链的饱和脂肪酸C20：0、C24：0含量增高。2、C16:0、C20:0、C26:0三种饱和脂肪酸中,碳链越长的饱和脂肪酸促进Aβ分泌、增加APP、BACE1、PS1 mRNA表达的作用越强,但并不影响NEP mRNA表达。3、饱和脂肪酸影响Aβ代谢的机制可能与活性氧增多有关。
【关键词】：阿尔茨海默病 老年大脑 饱和脂肪酸 Aβ代谢
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 第一部分 老年大鼠大脑皮质饱和脂肪酸组成的变化11-21
• 前言11-12
• 1 材料和方法12-15
• 2 结果15-17
• 3 讨论17-18
• 4 小结18-19
• 参考文献19-21
• 第二部分 不同链长饱和脂肪酸对SH-SY5Y细胞Aβ代谢的影响21-46
• 前言21-22
• 1 材料和方法22-36
• 2 结果36-39
• 3 讨论39-42
• 4 小结42-43
• 结论43-44
• 参考文献44-46
• 附图46-53
• 综述：APP/Aβ代谢的研究进展53-65
• 参考文献62-65
• 附录65-68
• 攻读学位期间发表的论文68-69
• 致谢69-70
• 个人简历70

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 马波,张建军;与阿尔茨海默病密切相关的α-,β-和γ-分泌酶的研究进展[J];国外医学.药学分册;2005年01期

2 王军锋;路睿;王以政;;淀粉样前体蛋白β切割的调控(英文)[J];Neuroscience Bulletin;2010年05期

3 陈耀民;赵永波;;β-分泌酶研究[J];医学教育探索;2010年10期

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本文编号：614869