慢性铜暴露恶化AD转基因小鼠空间记忆的关键分子筛选

发布时间：2017-08-26 08:18

  本文关键词：慢性铜暴露恶化AD转基因小鼠空间记忆的关键分子筛选

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【摘要】：目的:阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种常见的神经退行性疾病,其主要临床表现为认知功能的渐进性损伤。过量的铜暴露能够加速AD的发生与发展,但是目前对于铜是通过何种机制影响AD(如空间记忆)尚不清楚。本文旨在初步探讨慢性铜暴露对AD空间记忆的影响并筛选出参与该过程的关键蛋白。方法:本文选用6月龄的三转基因AD(3x Tg-AD)小鼠作为AD模型,用含250 ppm硫酸铜的饮用水喂养其6个月,同时以未暴露铜的3x Tg-AD小鼠和野生型(wide-type,WT)小鼠作为对照。首先,采用水迷宫实验检测慢性铜暴露对3x Tg-AD小鼠的记忆能力的影响。随后,我们利用荧光差异双向凝胶电泳(two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)结合质谱分析的方法研究慢性铜暴露对3x Tg-AD小鼠海马蛋白质组的影响。最后,使用Western blot对差异蛋白进行进一步的验证。结果:水迷宫实验结果显示,慢性铜暴露可加速3x Tg-AD小鼠的记忆损伤。2D-DIGE结合质谱分析的结果表明,在3x Tg-AD小鼠与WT小鼠海马组织中共有39个差异表达的蛋白。慢性铜暴露后的3x Tg-AD小鼠与未暴露的3x Tg-AD小鼠相比,其海马组织中共有37个差异表达的蛋白。其中,记忆相关蛋白complexin-1和complexin-2在未暴露的3x Tg-AD小鼠海马组织中表达量下调(与WT小鼠相比),而在慢性铜暴露后的3x Tg-AD小鼠海马组织中其表达量进一步下调。Western blot进一步验证了complexin-1与complexin-2的表达,其结果与2D-DIGE的结果的一致。结论:综上结果表明,慢性铜暴露加速了3x Tg-AD小鼠的记忆损伤,并改变了其海马组织中多种蛋白的表达。海马complexin-1和complexin-2蛋白可能是参与慢性铜暴露恶化3x Tg-AD小鼠记忆损伤过程的关键分子。
【关键词】：阿尔兹海默病 铜 记忆损伤 荧光差异双向凝胶电泳
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-7
• 第一章 引言7-15
• 1.1 AD背景简介7
• 1.2 AD病因假说7-9
• 1.3 AD与铜代谢9-11
• 1.4 蛋白质组学11-13
• 1.5 本课题的研究目的、意义与技术路线13-15
• 第二章 慢性铜暴露对 3xTg-AD小鼠记忆损伤影响的研究15-22
• 2.1 引言15
• 2.2 实验材料15-16
• 2.3 实验方法16-17
• 2.4 结果17-20
• 2.5 讨论20-21
• 2.6 本章小结21-22
• 第三章 慢性铜暴露对三转基因AD小鼠海马蛋白质组的影响22-58
• 3.1 引言22
• 3.2 实验材料22-26
• 3.3 实验方法26-35
• 3.4 结果35-53
• 3.5 讨论53-56
• 3.6 本章小结56-58
• 第四章 结论与展望58-60
• 4.1 结论58
• 4.2 展望58-60
• 参考文献60-70
• 附录70-71
• 硕士期间发表论文71-72
• 致谢72

【共引文献】

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本文编号：740624