Apelin-13激活PI3K和ERKs信号通路拮抗皮质酮诱导的PC12细胞凋亡

发布时间：2017-08-27 23:35

  本文关键词：Apelin-13激活PI3K和ERKs信号通路拮抗皮质酮诱导的PC12细胞凋亡

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【摘要】：研究背景及目的:众所周知,环境应激是精神障碍的风险因素之一。糖皮质激素在生理应激反应的调节中起重要的作用。有研究报道糖皮质激素的水平升高与抑郁症有关,皮质酮可以引起神经细胞退行性变甚至凋亡。Apelin和它的受体APJ广泛分布于中枢神经系统,其中包括与应激反应有关的边缘结构。Apelin通过与APJ结合来发挥保护神经细胞、心肌细胞、调控血压、HPA轴等多种作用。然而,Apelin在应激相关的疾病中的作用却不为人所知。PI3K/Akt和ERKs信号通路被公认在细胞增殖、分化、生存、凋亡中有重要的作用。近来有研究报道皮质酮参与调节PI3K/Akt和ERK1/2信号通路。因此,我们使用PC12细胞作为神经细胞模型,探讨Apelin是否通过激活PI3K/Akt和ERKs信号通路拮抗皮质酮诱导的PC12细胞的凋亡。方法:使用MTT染色酶标仪法检测细胞活力;Hoechst染色法、双染流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western-Blot法检测磷酸化Akt(p-Akt)、Akt、ERKs和胞外信号调节激酶(p-ERKs)以及活化的caspase-3的表达。结果:1.Apelin-13拮抗皮质酮诱导的PC12细胞的活力下降PC12细胞予以皮质酮(200,400,600,800和1000μM)处理24h,结果显示,随着皮质酮损伤浓度升高,PC12细胞活力逐渐下降。当不同浓度的Apelin-13(0.25,0.5,1,2和4μM)预处理细胞30min,然后再暴露于皮质酮(600μM)损伤环境中24h,结果显示:Apelin-13预处理后的PC12细胞活力较皮质酮损伤组明显改善。2.Apelin-13拮抗皮质酮诱导的PC12细胞的凋亡PC12细胞予以皮质酮(600μM)处理24h,皮质酮(600μM)显著的增加了PC12细胞凋亡率。用Apelin-13(4μM)预处理PC12细胞30min,然后再暴露于皮质酮(600μM)损伤环境中24h,结果显示:Apelin-13(4μM)明显减少了由皮质酮诱导的PC12细胞的凋亡。3.Apelin-13拮抗皮质酮对p-Akt和p-ERKs蛋白表达的抑制作用PC12细胞予以皮质酮(600μM)孵育24h后,皮质酮诱导的神经毒性显著的下调了p-Akt和p-ERKs在PC12细胞中的表达。Apelin-13(4μM)预处理细胞30min,然后暴露于皮质酮(600μM)损伤环境中24h则明显提升了p-Akt和p-ERKs在神经细胞中的活性。4.LY294002和PD98059阻断Apelin-13对皮质酮损伤PC12细胞的神经保护作用LY294002(10μM)和PD98059(20μM)预处理PC12细胞30min后,加入4μM Apelin-13预处理30min,再加入600μM皮质酮共处理24h。Apelin对皮质酮诱导的PC12细胞凋亡的保护作用被逆转。5.Apelin-13通过PI3K/Akt和ERKs信号通路拮抗皮质酮诱导的caspase-3的上调皮质酮(600μM)孵育PC12细胞24h后明显上调了caspase-3的表达水平。Apelin-13(4μM)预处理细胞30min,然后暴露于皮质酮(600μM)损伤环境中24h后逆转了皮质酮诱导的caspase-3的上调。在加入Apelin-13之前预处理LY294002或PD98059 30min阻断了Apelin-13诱导的caspase-3的下调。结论:Apelin-13激活PI3K/Akt和ERKs信号通路拮抗皮质酮诱导的PC12细胞的凋亡。
【关键词】：Apelin 皮质酮 凋亡 PI3K ERK PC12细胞
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R749.4
【目录】：

• 摘要5-8
• Abstract8-12
• 主要缩略词中英文对照索引12-14
• 第1章 绪论14-18
• 第2章 材料和方法18-24
• 第3章 结果24-32
• 第4章 讨论32-36
• 第5章 结论36-38
• 参考文献38-44
• 综述44-51
• 参考文献48-51
• 作者攻读学位期间的科研成果51-52
• 致谢52

【参考文献】

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1 李云峰,刘艳芹,黄文超,罗质璞;细胞保护作用是抗抑郁剂作用的共同通路之一(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2003年10期

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本文编号：746378