过表达miR-132改善阿尔茨海默病样学习记忆障碍

发布时间：2017-09-08 19:38

  本文关键词：过表达miR-132改善阿尔茨海默病样学习记忆障碍

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【摘要】：目的:获得过表达微小RNA-132(microRNA-132,miR-132)的慢病毒,并检测对Tg2576小鼠学习记忆损伤的改善。方法:从小鼠脑组织中克隆miR-132成熟序列上下游各100 bp的基因,将基因克隆至慢病毒表达载体p Lenti7.3,酶切鉴定并且DNA序列测定正确。p Lenti7.3-miR-132和Vira Power Packaging Mix共转染293FT细胞。72 h后收获上请,采用超速离心和聚乙二醇法纯化病毒颗粒并分装保存。分别以病毒颗粒感染细胞系和小鼠海马组织验证病毒的感染能力。Tg2576小鼠海马区注射病毒,Western blot和Morris水迷宫分别检测记忆相关蛋白水平和空间学习记忆能力。结果:所包装的miR-132病毒颗粒能够高效地感染细胞系,并且在体内也有理想的感染效率。和对照组相比,过表达miR-132的Tg2576小鼠PSD95和GluR1明显升高,并且空间依赖的学习记忆能力明显提高。结论:过表达miR-132通过影响突触相关蛋白PSD95和GluR1的水平改善Tg2576小鼠的空间学习记忆能力障碍。
【作者单位】： 河南医学高等专科学校;河南大学医学院;
【关键词】： 微小RNA- 病毒包装 Tg小鼠 学习 记忆
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81401062;No.U1504809)
【分类号】：R749.16
【正文快照】： 微小RNA(microRNA,miRNA)是在1993年被发现的一类在进化上非常保守,短的(大约21~22nt),非编码的RNA分子[1]。人源miR-132定位于染色体17p13.3,富含于脑组织,尤其是在海马区高表达。miR-132在多种神经系统相关疾病或者模型动物中表达下调,包括阿尔茨海默病(Alzheimer di-sease,

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1 王耀辉;王明丽;陈九格;张晶;马远方;;靶向TIPE2基因的shRNA慢病毒载体构建及病毒包装[J];河南大学学报(医学版);2014年02期

2 刘华;倪松石;张引子;;Rho鸟苷酸解离抑制因子-2过表达载体的构建与慢病毒包装[J];南通大学学报(医学版);2013年01期

3 方红;杨文理;何涛;;用于慢病毒包装的高纯度质粒DNA的大量制备和应用[J];泸州医学院学报;2014年03期

4 刘s，

本文编号：815971