BMPs-ERK5信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化的研究
本文关键词：BMPs-ERK5信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化的研究
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【摘要】：目的比较骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)2、7、9对人牙周膜干细胞human periodontal ligament stem cells,h PDLSCs㖞成骨分化的诱导作用,探讨BMPs-ERK5信号通路在成骨分化中的作用。方法首先采用组织块酶消化法分离培养原代h PDLSCs并鉴定,利用腺病毒载体介导的GFP、BMP2、BMP7和BMP9(Ad-GFP、Ad-BMP2、Ad-BMP7、Ad-BMP9)分别感染h PDLSCs,通过早期成骨分化指标碱性磷酸酶活性定性和定量检测、茜素红染色检测晚期成骨分化指标钙盐结节沉积情况、qRT-PCR检测细胞成骨分化相关基因骨钙蛋白和骨桥蛋白mRNA表达,比较发现BMP9对细胞成骨分化的作用最强;采用Ad-BMP9感染h PDLSCs 24 h后,检测BMP9作用PDLSCs后对ERK5磷酸化水平的影响和ERK5信号通路特异性抑制剂BIX02189预处理后BMP9-ERK5通路对h PDLSCs成骨分化的影响。结果 1分离培养的h PDLSCs为成纤维细胞样,呈漩涡状生长,抗波形蛋白表达阳性,抗角蛋白表达阴性,具有间充质属性和克隆形成能力。2BMP2、BMP7和BMP9均有促进细胞成骨分化作用,其中3组的碱性磷酸酶定量结果和成骨分化相关基因相对表达量与GFP组比较,差异具有统计学意义(P0.05),且BMP9效力最强。3Western blot检测显示BMP9增强p-ERK5的表达。而抑制剂BIX02189呈剂量依赖性地抑制p-ERK5的表达。BIX02189预处理细胞后、感染Ad-BMP9的结果显示,BMP9对细胞的促成骨作用较未处理组明显降低,其中BMP9组的碱性磷酸酶定量分析结果与成骨分化相关基因相对表达量与BIX02189处理组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 BMP9具有较强的促h PDLSCs成骨分化作用,ERK5信号转导途径在BMP9诱导h PDLSCs成骨分化过程中发挥了正向调节作用。
【作者单位】： 重庆医科大学附属口腔医院预防口腔科;重庆医科大学附属口腔医院重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室;重庆医科大学附属口腔医院口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室;
【关键词】： 骨形态发生蛋白 牙周膜干细胞 成骨分化 细胞外信号调节激酶
【基金】：重庆市自然科学基金一般项目(CSTC2012jj A10156) 重庆市渝北区科研项目[2014(社)16号] 重庆高校创新团队建设计划(2013)~~
【分类号】：R781
【正文快照】： 级口腔生物医学工程重点实验室2,口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室3)and the Project of Innovation Team Construction Plan of Chongqing Higher Education(2013).Corresponding author:Zhang Yan,E-mail:lexiner82@126.com随着对牙周炎发病机制的深入研究和牙周组织工程
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，本文编号：1134059
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