云南烟叶提取物辅酶Q10对实验性牙周炎抗炎抗氧化的机制研究

发布时间：2017-11-10 07:13

  本文关键词：云南烟叶提取物辅酶Q10对实验性牙周炎抗炎抗氧化的机制研究

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【摘要】：[目的]通过构建大鼠实验性牙周炎模型以及RAW264.7巨噬细胞的体外炎症模型,探讨云南烟叶提取物辅酶Q10 (CoQ10)对牙周炎的治疗作用及机制,为临床上牙周炎的药物防治提供理论依据。[方法]①选取6-8周龄清洁级SD大鼠126只。随机抽取18只作为正常组(N组),其余108只通过双侧上颌第二磨牙丝线结扎+黏性高糖饮食复制大鼠牙周炎模型。并将成模大鼠按随机区组的分组方法分为模型组(P组)、替硝唑组(T组)、维生素C组(VC组)、CoQ10低剂量组(LQ组)、CoQ10中剂量组(MQ组)、CoQ10高剂量组(HQ组),每组18只。LQ、MQ、HQ组分别灌胃给予15、30、60mg/kg的CoQ10;T组首日灌胃给予200mg/kg的替硝唑,次日灌胃给予100mg/kg的替硝唑；VC组灌胃给予100mg/kg的维生素C；N组、P组则按等量的CoQ10溶剂(调和油)灌胃。各组按上述剂量连续灌胃,每天一次。第2、4、6周末每组随机抽取6只大鼠,进行腹主动脉采血+EDTA抗凝,离心血样并收集上清血浆样本,检测炎症因子IL-1β、TNF-α、PGE2和氧化应激指标SOD、GSH-Px、MDA的水平；收集上颌骨样本,检测牙槽骨丧失(ABL)值,以及进行HE染色和TRAP染色。②大肠杆菌脂多糖LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7构建体外炎症模型。实验分组为模型组；不同浓度CoQ10组(1.875、3.75、7.5、15、30μmol/L);维生素C组(200μmol/L),以上各组分别加入终浓度为1 mg/L的LPS刺激液,同时设正常组。37℃、5%CO2共同孵育24 h,而后收集细胞上清液,ELISA检测上清液中IL-1β、TNF-α和PGE2的含量;收集细胞,检测氧化应激指标SOD、GSH-Px、MDA。数据均由SPSS17.0数据统计软件分析。[结果]1.造模4周后,造模大鼠牙龈指数、ABL值均高于N组(P0.05),HE染色观察到造模大鼠的结合上皮与牙体分离,固有层炎性细胞浸润,上皮钉突向结缔组织伸长,胶原纤维排列紊乱,可见牙槽嵴顶的破坏吸收,即造模成功。2. 在6周的观察期内,灌胃CoQ10大鼠的ABL值及破骨细胞数与P组之间差异无统计学意义(P0.05)。T组、VC组的ABL值及破骨细胞数与CoQ10各剂量组相似(P0.05)。3.高、中、低剂量的CoQ10均能显著抑制牙周炎大鼠外周血中IL-1β、TNF-α、PGE2的水平,提升牙周炎大鼠外周血中SOD、GSH-Px的活性、降低MDA含量(P0.05)。且CoQ10各剂量组对三种炎症因子的抑制作用与T组、VC相似(P0.05)。CoQ10各剂量组对三种抗氧化指标的改善与VC组之间差异不具有统计学意义(P0.05)4.CoQ10能显著抑制LPS刺激下RAW264.7细胞对IL-1β、TNF-α、PGE2的分泌,提高细胞内SOD、GSH-Px的活性和降低MDA含量(P0.05)。且效果与维生素C相似(P0.05)。[结论]1.通过对大鼠行双侧上颌第二磨牙丝线结扎+黏性高糖饮食,4周即可成功建立大鼠牙周炎模型。2.在6周的观察期内,未发现CoQ10对大鼠牙槽骨丧失及相应破骨细胞数产生影响,尚不能认为CoQ10可改善牙周炎所导致的骨吸收。3.本实验中发现通过对大鼠牙周炎模型灌胃给予CoQ10,可显著减少大鼠血浆中IL-1β、TNF-α、PGE2的水平,显著增加SOD、GSH-Px的活力,减少MDA的量,改善机体氧化应激状态,使炎症反应降低。4.体外实验表明CoQ10可抑制LPS刺激下RAW264.7细胞IL-1β、TNF-α、PGE2的释放,增加细胞内SOD、GSH-Px的活力,减少MDA含量。表明CoQ10具有抗炎和抗氧化的能力,可抑制氧化应激,并降低炎症反应。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R781.4

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