慢性牙周炎不同临床阶段龈沟液及血清中Th17和Treg的相关细胞因子的检测

发布时间：2017-11-10 15:19

  本文关键词：慢性牙周炎不同临床阶段龈沟液及血清中Th17和Treg的相关细胞因子的检测

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【摘要】：目的:牙周炎是发生在牙周组织的慢性感染性疾病。牙周致病菌和宿主免疫反应共同作用影响牙周炎的发展。辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)和调节性T细胞(regulation T cells,Treg)及相关细胞因子在牙周炎发病过程中发挥重要作用。本实验以慢性牙周炎患者为研究对象,用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测龈沟液及血清中白细胞介素17(interleukin 17,IL-17)、白细胞介素23(interleukin23,IL-23)、白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)的水平。分析IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β之间及其与牙周炎各项临床指标间的关系,探讨Th17细胞和Treg细胞在慢性牙周炎发病机制方面所起的作用。为慢性牙周炎的发生发展过程提供免疫学的依据,进而从免疫学角度阐述慢性牙周炎发病机制并为其治疗提供理论依据。方法:选择河北省口腔医院口腔内科门诊患者。根据口腔情况分为4组:正常对照组(A组)10例,牙龈炎组(B组)10例,慢性牙周炎轻度组(C组)9例,慢性牙周炎中重组(D组)11例,检查全口余留牙齿并详细记录每颗牙的牙周情况及除第三磨牙外的所有缺牙数。牙周检查包括:菌斑指数(PLI)、出血指数(BI)、探诊深度(PD)、附着丧失(AL)等,同时拍摄常规X线曲面断层片辅助诊断。1检测龈沟液内IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的水平:所有受试者均选取六颗指数牙(16、11、26、36、31、46),取6颗指数牙的近中颊位点的牙周指标的均值来代表该患者的牙周情况,从而保证实验设计的科学性。用吸潮纸尖收集所有受试牙的近中颊位点的龈沟液并混合,采用ELISA法检测龈沟液中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的浓度,并与各临床指标作相关性检验。2检测血清中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β水平:清晨空腹采集受试者外周静脉血6 mL,2 mL肝素抗凝血用于检测白细胞分类计数(中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)。剩余4 mL离心取上清,采用ELISA法检测血清中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的浓度,并与各临床指标作相关性检验。结果:1龈沟液的量的变化B组、C组、D组龈沟液的量均显著高于A组,有统计学意义(P0.05);C组、D组龈沟液的量均显著高于B组,有统计学意义(P0.05);D组龈沟液的量显著高于C组,有统计学意义(P0.05)。龈沟液的量与PD、AL呈正相关关系(r=0.889,P0.01;r=0.843,P0.01)。2四种细胞因子的浓度变化2.1 IL-17B组、C组、D组龈沟液及血清中IL-17浓度均显著高于A组,有统计学意义(P0.05);C组、D组龈沟液及血清中IL-17浓度均显著高于B组,有统计学意义(P0.05);D组龈沟液及血清中IL-17浓度均显著高于C组,有统计学意义(P0.05)。在龈沟液中,IL-17浓度与PD、AL呈正相关关系(r=0.726,P0.01;r=0.796,P0.01);在血清中,IL-17浓度与PD、AL呈正相关关系(r=0.856,P0.01;r=0.818,P0.01)。2.2 IL-23B组、C组、D组龈沟液及血清中IL-23浓度均显著高于A组,有统计学意义(P0.05);C组、D组龈沟液及血清中IL-23浓度均显著高于B组,有统计学意义(P0.05);D组龈沟液及血清中IL-23浓度均显著高于C组,有统计学意义(P0.05)。在龈沟液中,IL-23浓度与PD、AL呈正相关关系(r=0.830,P0.01;r=0.863,P0.01);在血清中,IL-23浓度与PD、AL呈正相关关系(r=0.855,P0.01;r=0.859,P0.01)。2.3 IL-17与IL-23相关性在龈沟液及血清中,IL-17浓度与IL-23浓度均呈正相关关系(r=0.777,P0.01;r=0.743,P0.01)。2.4 IL-10B组、C组龈沟液中IL-10浓度均显著高于A组,有统计学意义(P0.05);C组龈沟液中IL-10浓度显著高于B组,有统计学意义(P0.05);D组龈沟液中IL-10浓度均显著低于A、B、C组,有统计学意义(P0.05)。在血清中,A组、B组、C组、D组中IL-10浓度两两之间差异均无统计学意义(P0.05)。在龈沟液中,IL-10浓度与AL呈负相关关系(r=-0.324,P0.05)。2.5 TGF-βB组、C组龈沟液中TGF-β浓度均显著高于A组,有统计学意义(P0.05);C组龈沟液中TGF-β浓度显著高于B组,有统计学意义(P0.05);D组龈沟液中TGF-β浓度均显著低于A、B、C组,有统计学意义(P0.05)。在血清中,A组、B组、C组、D组中TGF-β浓度两两之间差异均无统计学意义(P0.05)。2.6 IL-10与TGF-β的相关性在龈沟液中,IL-10浓度与TGF-β浓度呈正相关关系(r=0.794,P0.01)。2.7在A组、B组、C组、D组中,IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β在龈沟液中的浓度均显著高于血清,有统计学意义(P0.05)。结论:1牙龈炎组、慢性牙周炎轻度组、慢性牙周炎中重度组龈沟液及血清中IL-17、IL-23的表达水平高于正常对照组,且随着牙周探诊深度和附着丧失程度的加重IL-17、IL-23表达增加。IL-17、IL-23的表达与慢性牙周炎发生发展密切相关,可以反映牙周组织破坏的程度。2龈沟液及血清中IL-17和IL-23的浓度均呈正相关关系,慢性牙周炎的发生发展过程中存在IL-23/IL-17炎性轴。3牙龈炎组、慢性牙周炎轻度组龈沟液中IL-10、TGF-β的表达水平高于正常对照组,慢性牙周炎中重度组龈沟液中IL-10、TGF-β的水平低于正常对照组,而血清中这四组IL-10、TGF-β的浓度无明显差异,说明Treg细胞主要在慢性牙周炎局部组织中发挥免疫抑制作用。4 IL-17、IL-23的表达水平随牙周炎症的加重而增加,牙龈炎及慢性牙周炎早期IL-10、TGF-β的表达水平增加,而到了慢性牙周炎中晚期IL-10、TGF-β的水平降低,说明随慢性牙周炎炎症的加重出现了Th17/Treg细胞及相关细胞因子的失衡。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R781.4

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本文编号：1167195