下颌前移矫治器对OSAHS兔颏舌肌NF-κB和TNF-α、IL-6的影响
发布时间:2017-12-07 16:13
本文关键词:下颌前移矫治器对OSAHS兔颏舌肌NF-κB和TNF-α、IL-6的影响
更多相关文章: 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 下颌前移矫治器 颏舌肌 NF-κB TNF-α IL-6
【摘要】:目的:本研究拟通过建立新西兰大白兔OSAHS模型及其下颌前移矫治器(mandibular advancement device,MAD)的治疗,研究OSAHS以及MAD治疗对颏舌肌组织(genioglossus,GG)中NF-κB P65及炎症细胞因子TNF-α和IL-6的影响。探讨OSAHS对GG损害的可能炎性机制,为OSAHS导致GG损害的发病机理研究以及MAD治疗OSAHS对GG影响的研究提供一定的理论基础。方法:1动物分组:纯种雄性新西兰大白兔18只,6月龄,体重3.0kg~3.5kg。随机分为3组,每组6只,分别是1)阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征组(Group OSAHS)2)下颌前移矫治器组(Group MAD)和3)正常对照组(control group)。2动物模型的建立:造模前将三组实验动物置于仰卧位,进行上气道螺旋CT扫描(美国Lightspeed GE16层型螺旋CT机)和多导睡眠监测(美国邦德Monet型多导睡眠监测系统),以排除先天性OSAHS或解剖性上气道狭窄。1%戊巴比妥钠对OSAHS组和MAD组动物行全身麻醉后,在距软硬腭交界1.5cm处的软腭黏膜下肌层注射聚丙烯酰胺水凝胶混合物2ml。注射完成后,应用以上同样方法拍摄上气道螺旋CT并进行多导睡眠监测,以确定OSAHS动物模型建立成功。OSAHS动物模型建立成功后,MAD组的OSAHS兔适应3天后佩戴下颌前移矫治器(MAD)。MAD由自凝牙托粉和牙托水制作而成,用玻璃离子粘结剂粘固于上前牙。当MAD戴入兔口内后,其前斜面与上颌平面成60°角,导下颌前移3mm~4mm,咬合打开2mm~3mm。建模完成后,应用以上同样方法拍摄上气道螺旋CT并进行多导睡眠监测,以评估MAD的疗效。3仰卧位睡眠建模完成后第4天,检查实验动物注射伤口,无破溃、无感染,进食、进水无异常。接下来的8周,每日上午按5ml/kg~6ml/kg的剂量对三组实验动物经口腔灌注10%水合氯醛,使其仰卧位睡眠2小时~4小时。其余时间正常进食进水自由活动。4标本的采集及处理8周后,术前24小时禁食禁水,经耳缘静脉以2ml/kg的剂量注射1%戊巴比妥钠,对动物行全身麻醉。将兔置于仰卧位并固定四肢,打开口腔后将舌抬起,逐层分离舌下筋膜、肌肉暴露颏舌肌,将颏舌肌的两端固定后小心离断,用预冷的生理盐水冲洗表面血液,将每只兔的颏舌肌组织剪成大小、体积相似的两块,液氮速冻,-80℃冻存。5颏舌肌(GG)细胞核中NF-κB P65蛋白的表达量测定按照核蛋白提取试剂盒说明书抽提三组动物GG中的核蛋白,然后用BCA法测定核蛋白的蛋白浓度,确定蛋白上样量。蛋白质免疫印迹分析法(Western Blot)测定NF-κB P65蛋白相对于细胞核内参蛋白—组蛋白3(Histone 3,H3)的表达量。6颏舌肌(GG)中炎症细胞因子TNF-α和IL-6的浓度测定按照兔肿瘤坏死因子α(TNF-α)和兔白细胞介素6(IL-6)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书测定三组动物GG中的TNF-α和IL-6在波长为450nm下的吸光度值,按照标准曲线计算出炎症细胞因子TNF-α和IL-6的浓度。7相关性分析将三组动物GG中NF-κB P65蛋白相对表达量与TNF-α和IL-6的浓度以及AHI、Sa O2进行相关性分析。结果:1动物的一般情况:建模3天后,各组动物均能正常饮水、进食、自由活动。三组动物在建模前、建模2周以及建模8周后的体重无明显差异。它们在仰卧位睡眠时,OSAHS组鼾声明显且不均匀,睡眠过程中易惊醒;MAD组部分呼吸音较重或轻微打鼾,基本平稳;正常对照组呼吸均匀,状态平稳。2上气道螺旋CT结果:OSAHS组与MAD组、对照组比较,软腭1/4点1/2点和3/4点处上气道矢状向间隙及上气道横截面积均明显减小,差异有显著性(P0.05);而MAD组较对照组上述指标虽然减小,但差异无显著性(P0.05)。3多导睡眠监测记录:OSAHS组动物与MAD组、对照组相比,呼吸暂停低通气指数升高、血氧饱和度下降、睡眠效率减低,差异有显著性(P0.05);MAD组较对照组以上指标的变化无显著性差异(P0.05)。4颏舌肌(GG)细胞核中NF-κB P65蛋白相对表达量:OSAHS组、MAD组和正常对照组的NF-κB P65蛋白相对表达量分别为0.44±0.08、0.30±0.09、0.24±0.07。OSAHS组较MAD组、对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);MAD组与对照组相比升高,但无统计学意义(P0.05)。5颏舌肌(GG)中TNF-α和IL-6的浓度:OSAHS组、MAD组和正常对照组的TNF-α浓度分别为96.80±18.00pg/ml、71.16±20.18pg/ml、64.80±19.51pg/ml。OSAHS组较MAD组、对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);MAD组与对照组相比升高,但无统计学意义(P0.05)。OSAHS组、MAD组和正常对照组的IL-6浓度分别为93.30±16.97pg/ml、69.25±14.28pg/ml、63.49±13.15pg/ml。OSAHS组较MAD组、对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);MAD组与对照组相比升高,但无统计学意义(P0.05)。6 GG细胞核中NF-κB P65与TNF-α和IL-6相关性分析:NF-κB P65与TNF-α和IL-6浓度呈明显正相关,r值分别0.886、0.862,P值均为0.000。7 GG中NF-κB P65与AHI和Sa O2相关性分析:NF-κB P65与AHI成正相关,r值为0.722,P值为0.000;NF-κB P65与SaO_2成负相关,r值为-0.685,P值为0.000。结论:1 OSAHS会引起颏舌肌中NF-κB活化增加,TNF-α、IL-6浓度升高,这些炎症指标水平的上升可能是颏舌肌疲劳性增加的机制之一。2下颌前移矫治器(MAD)治疗OSAHS可减少颏舌肌中NF-κB的活化,降低TNF-α、IL-6浓度,对颏舌肌起保护作用。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R782.2
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 曹晓羽;涂红缨;;阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征发病机制研究进展[J];南昌大学学报(医学版);2014年06期
2 关建;易红良;孟丽丽;苏开明;殷善开;;肿瘤坏死因子α基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征及代谢综合征共病性研究[J];中国耳鼻咽喉头颈外科;2013年01期
3 方年富;李弼民;;核因子κB信号通路的研究进展[J];重庆医学;2012年01期
4 曹卓;王良兴;;CPAP治疗阻塞型睡眠呼吸暂停综合征前后患者血清IL-6和TNF-α的动态变化[J];放射免疫学杂志;2009年01期
5 曾祥龙;高雪梅;;阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的口腔医学研究现状[J];北京大学学报(医学版);2009年01期
6 齐娟;刘月华;宋纬华;邵校;王飞;;雌激素对慢性间歇性低氧大鼠颏舌肌收缩功能及超微结构的影响[J];实用口腔医学杂志;2008年02期
7 李艳玲;陈晓辉;刘世明;邝锦辉;曹梅;陈晓军;张永健;苏杭;;OSAHS患者外周血中白介素6水平及其mRNA表达的变化和意义[J];广州医学院学报;2007年02期
8 王干;罗伟;;阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与咽部神经肌肉关系的研究进展[J];中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志;2013年03期
,本文编号:1262971
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/kouq/1262971.html
最近更新
教材专著