心理应激对大鼠髁状突组织学及MMP13和TIMP1影响的实验研究

发布时间：2018-01-15 06:19

  本文关键词：心理应激对大鼠髁状突组织学及MMP13和TIMP1影响的实验研究　出处：《河北医科大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:采用多种心理应激方法对大鼠进行刺激,通过观察空白对照组和心理应激组大鼠髁突的组织学变化及髁突内MMP-13和TIMP-1的变化,对空白对照组和心理应激组进行对照研究,将数据结果进行整理、统计、分析,探讨心理应激对颞下颌关节的影响。方法:1实验动物:健康清洁级雄性Wistar大鼠42只,体重200g±20g,由河北医科大学实验动物中心提供。2刺激方法:刺激试验的时间分别为刺激2周,4周和6周,采用随机数的方法将七种刺激随机安排到每周内,每日上午进行应激处理,每日1种刺激,同种不连续出现,随机进行,使大鼠不能预知刺激。七种刺激方式分别为:(1)束缚1h;(2)冲水1h;(3)禁食24h;(4)电子驱鼠器1h;(5)泡水1h;(6)禁水24h;(7)潮湿垫料24h。3实验方法:42只大鼠随机分为两组,空白对照组21只,心理应激组21只,每组再按照试验时间分为2周、4周和6周三个亚组,每个亚组各7只。各组大鼠体重通过均衡检验,证实无差别。各组大鼠分开饲养,饲养条件及环境均相同。实验开始前先将各组大鼠放入饲养箱中,使其适应环境1周,期间不给任何刺激。实验开始后,空白对照组不给任何刺激,心理应激组按照刺激方法给予刺激,实验结束后,按照2周、4周和6周的时间分别处死各组大鼠,取材,分别行HE染色和免疫组织化学染色。4研究方法:空白对照组和心理应激组均行HE染色和免疫组织化学染色,通过HE染色显示大鼠髁突的组织学变化,通过免疫组化染色测量髁突中MMP-13和TIMP-1的含量变化。通过上述两方面的变化研究心理应激对颞下颌关节的影响。5统计方法:将各指标所测得数据采用SPSS21.0软件进行统计分析,MMP-13测量结果统计分析采用秩和检验,TIMP-1测量结果统计分析采用方差分析,检验水准P�d0.05。结果:1髁突组织学变化:对照组髁突软骨表面整齐平滑,软骨层排列整齐,未发现纤维化,骨小梁正常。实验组2周组髁突软骨表面略显粗糙,软骨层出现纤维化,表面带的胶原纤维发生变性,走行方向不清,呈弥漫的无结构样均质物。实验组4周组髁突软骨表面粗糙明显,软骨基质溶解,骨细胞消失,骨陷窝空虚,骨小梁出现不规则微裂,甚至崩解,相邻骨髓腔融合。实验组6周组出现修复性反应,髁突软骨表面略显粗糙,软骨层轻微纤维化,表面带的胶原纤维有轻微变性,偶有骨细胞消失。2髁突中MMP-13免疫组化检测结果:对照组,实验组2周组,实验组4周组,实验组6周组MMP-13阳性细胞计数两两比较。对照组和实验组2周组MMP-13阳性细胞计数有统计学差异(P�d0.05),对照组和实验组4周组MMP-13阳性细胞计数有统计学差异(P�d0.05),实验组2周组和实验组4周组MMP-13阳性细胞计数有统计学差异(P�d0.05),实验组4周组和实验组6周组MMP-13阳性细胞计数有统计学差异(P�d0.05),对照组和实验组6周组MMP-13阳性细胞计数无统计学差异(P�e0.05),实验组2周组和实验组6周组MMP-13阳性细胞计数无统计学差异(P�e0.05)。3髁突中TIMP-1免疫组化检测结果:对照组,实验组2周组,实验组4周组,实验组6周组TIMP-1阳性细胞计数两两比较。对照组和实验组2周组TIMP-1阳性细胞计数有统计学差异(P�d0.05),对照组和实验组4周组TIMP-1阳性细胞计数有统计学差异(P�d0.05),实验组2周组和实验组4周组TIMP-1阳性细胞计数有统计学差异(P�d0.05),实验组4周组和实验组6周组TIMP-1阳性细胞计数有统计学差异(P�d0.05),对照组和实验组6周组TIMP-1阳性细胞计数无统计学差异(P�e0.05),实验组2周组和实验组6周组TIMP-1阳性细胞计数无统计学差异(P�e0.05)。结论:1心理应激可使大鼠髁突组织发生病理性的改变,短期内(4周内)随着应激时间的延长,这种病理性的改变逐渐加重。2心理应激可使大鼠髁突组织发生病理性的改变,短期内随着应激时间的延长,这种病理性的改变逐渐加重,但之后(4周后)髁突会出现一定程度的修复。3 MMP-13和TIMP-1参与了心理应激下大鼠髁状突组织病理性变化的过程。
[Abstract]:Objective: using the methods of psychological stress stimulation in rats, the changes of MMP-13 and TIMP-1 and pathological changes of the condyle through observation of blank control group and psychological stress group rat condylar tissue, the blank control group and psychological stress group were compared, the results are collated data, statistics, analysis, to explore the influence of the psychological stress of the temporomandibular joint. Methods: 1 animal experiment: healthy male Wistar 42 rats, weighing 200g + 20g, provided by the experimental animal center of Hebei Medical University.2 stimulation method: stimulation test time were stimulated for 2 weeks, 4 weeks and 6 weeks, using the method of random number will be seven kinds of stimuli randomly assigned to weekly, daily morning stress treatment, daily 1 kinds of stimuli, with discontinuous, random, the rats can not predict stimulation. Seven kinds of stimulation methods are: (1) bound 1H; (2) 1H (3) fasting water; 24h; (4) electricity 瀛愰┍榧犲櫒1h;(5)娉℃按1h;(6)绂佹按24h;(7)娼�婀垮灚鏂�24h.3瀹為獙鏂规硶:42鍙�澶ч紶闅忔満鍒嗕负涓ょ唬�

本文编号：1427153