含MDP单瓶装自酸蚀粘接剂诱导重组Ⅰ型胶原仿生矿化的研究

发布时间：2018-02-26 05:05

  本文关键词： MDP Ⅰ型胶原 仿生矿化 单瓶装自酸蚀粘接剂　出处：《浙江大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:本实验选取含MDP与不含MDP的单瓶装粘接剂,研究这些粘接剂能否诱导重组Ⅰ型胶原在人工唾液中实现仿生矿化。方法:1、单层重组Ⅰ型胶原模型制备:将鼠尾来源的Ⅰ型胶原溶液(3mg/L,Invitrogen,美国)加入至缓冲液(pH=9.2,50mM甘氨酸、200mM KCl)中稀释至50μg/ml,室温下自组装20分钟。将3μl胶原溶液滴在400目透射电镜镍网上,37℃恒温箱内过夜,次日经0.05wt%戊二醛溶液交联1小时,取出后用去离子水清洗,室温下干燥、备用。共制备98个镍网,从中随机选取2个用1%乙酸铀负染10秒,通过透射电镜判断胶原是否组装成功。2、将余下的96个镍网随机分为以下几组(1)实验组:选取3种含MDP的单瓶装自酸蚀粘接剂作为实验组(n=16):①Single Bond Universal(SBU,3M ESPE,美国);②Clearfil Universal Bond(CUB,可乐丽,日本);③Clearfil S3 Bond(CSB,可乐丽,日本);(2)对照组:选取2种不含MDP的单瓶装自酸蚀粘接剂作为对照组(n=16):①Tetric N-Bond(TNB,义获嘉伟瓦登特,列支敦士登);②G-Bond(GB,GC,日本);(3)空白对照组(n=16):将未经粘接剂处理的镍网作为空白对照组。将上述5种粘接剂各取一滴,用小毛刷以划"十字"的方式轻涂在镍网表面的胶原上,并光照固化。取2ml人工唾液于培养皿中,将镍网含胶原面漂浮于人工唾液上,每个培养皿中放置4个,37℃恒温孵育1、4、7、14天后取出。每组每个时间点取4个样本,样本经去离子水清洗、干燥后用透射电镜(TEM)观察胶原矿化情况,并对实验组所有14天的样本进行选区电子衍射(SAED)观察其晶相情况。结果:TEM结果显示,TNB组、GB组及空白对照组的所有样本均未出现胶原矿化。SBU组1天的样本便能观察到胶原开始矿化,7天和14天的样本可观察到大部分胶原已经矿化,并呈纤维内矿化。CSB组1天样本未见矿化,而4天的样本中可见部分胶原出现矿化,7天和14天的样本也同样观察到胶原纤维内矿化的出现。CUB组1、4、7天的样本均未发现矿化,仅在14天的样本中观察到少量胶原矿化。SAED的结果提示,沉积在胶原纤维内的矿物质为羟基磷灰石晶相结构。结论:本研究所采用的含MDP单瓶装自酸蚀粘接剂均可以诱导重组Ⅰ型胶原实现仿生矿化,但其矿化能力各有差异。
[Abstract]:Objective: to select a single bottle adhesive containing MDP and no MDP. To study whether these binders can induce recombinant type I collagen to realize biomimetic mineralization in artificial saliva. Methods: 1: 1, monolayer recombinant type 鈪，

本文编号：1536608