含氧化石墨烯的暂封牙胶抗菌性能的初步研究

发布时间：2016-11-02 09:34

  本文关键词：含氧化石墨烯的暂封牙胶抗菌性能的初步研究，由笔耕文化传播整理发布。

《浙江大学》 2015年

含氧化石墨烯的暂封牙胶抗菌性能的初步研究

叶凌赟  

【摘要】：目的：初步研究掺杂有氧化石墨烯的暂封牙胶的对大肠杆菌(Escherichia coli, E. coli, ATCC25922)的抗菌性能。 方法：使用恒温水浴锅将暂封牙胶加热到80℃,加入氧化石墨烯(graphene oxide,GO,苏州恒球石墨烯科技有限公司,苏州,中国),制作成掺杂有氧化石墨烯的牙胶样本(圆饼状,直径10mm,厚1mm)。按照掺杂的GO质量分数的不同(0%,0.5%,1%,2%,3%),分为六组实验组,分别记为OGO、0.5GO、1GO、2GO、3GO,而同样形状大小的灭菌洁净玻片作为空白对照。挑取大肠杆菌单菌落置于10mLLB液体培养基中,37℃C恒温摇床220rpm培养12h后,使用酶标仪读取OD550值,换算成菌液浓度,然后按照十倍梯度稀释法经行稀释,得到想要的初始菌液浓度。采用平板菌落计数法和荧光显微镜观察GO的掺杂对暂封牙胶抗菌性能的影响。1.平板菌落计数：1.1将六组样本(玻片、OGO、0.5GO、1GO、2GO、3GO)各一片加入10mL菌液(初始浓度：1106CFU/mL),37℃C恒温摇床220rpm需氧培养18h,稀释106倍,取50μL均匀涂布于固体LB (Luria-Bertani)培养基,37℃培养箱培养24h,做平板菌落计数,推算各组菌液终末浓度。1.2制备初始菌液浓度分别为1106CFU/mL和1105CFU/mL的菌悬液。在各初始浓度条件下,将菌液滴于各组样本表面,菌液量为60μL/cm2,样本置于平皿中,放入无菌湿盒中37℃需氧培养24h,吸取培养后菌液,稀释100倍,取50μL均匀涂布于LB固体培养基,37℃需氧培养24h后做平板菌落计数。2.细菌粘附/细菌活力荧光检测：设置五组(0G0、0.5GO、1GO、2G0、3G0),牙胶浸泡于大肠杆菌菌悬液(初始浓度：1106CFU/mL)中培养18h,使用SYTO0/PI(LIVE/DEAD BacLightTM Bacterial Viability, L1304567,Life technologies, Eugene Oregon, USA),避光染色10min,荧光显微镜观察样本表面活菌/死菌的粘附。 结果：1.平板菌落计数法：实验1.1显示将样本置于菌液中培养18h后,各组菌液终末浓度无明显差异,均达到109CFU/mL。实验1.2显示将微量菌液滴于样本表面培养24h后做平板菌落计数,各牙胶组的菌落数均明显少于玻片组,3GO的菌落数明显少于其他牙胶组。2.荧光显微镜观察发现在SYTO9孵育下,未在菌液中培养的成品牙胶显示点状荧光显像。在PI孵育下,未在菌液中培养的成品牙胶表面未发现细菌样荧光显像；而经菌液孵育后的各组样本表面均发现红色细菌样荧光显像,2GO、3GO样本表面死菌数量多于其余三组(OGO、0.5GO、1GO),且后三组肉眼观察视野内的死菌数量无明显差异。 结论：在本实验的条件下,掺杂有氧化石墨烯的牙胶对大肠杆菌具有微弱的抑菌作用。

【关键词】：
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R781.05
【目录】：

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