淫羊藿苷对大鼠快速扩弓及保持过程中腭中缝骨形成的影响

发布时间：2018-04-09 20:27

本文选题：快速扩弓　切入点：淫羊藿苷　出处：《山东大学》2017年硕士论文

【摘要】：快速扩弓是正畸医生常用的临床技术,被用于牙列拥挤、牙弓狭窄及前牙反(?)病例的矫治。在快速扩弓过程中,腭中缝在矫形力的作用下被打开,成骨过程被激活,新骨不断在骨缝边缘沉积,最终使上颌骨在新的位置上稳定下来。然而,尽管快速扩弓的疗效已经被绝大多数正畸医生所认可,但快速扩弓过程中仍有诸多问题出现,如牙根吸收、牙龈退缩、扩弓量不足、不对称扩弓以及扩弓后复发。复发是扩弓治疗后最普遍的并发症之一。在快速扩弓过程中被打开的骨缝无法在扩弓期和保持期内形成充足的骨质被认为是导致复发的重要原因之一。因此在上颌快速扩弓治疗过程中,加速腭中缝骨质的形成和沉积是保证快速扩弓效果最重要的环节。为此各国学者尝试了若干方法促进腭中缝新骨的形成,这些方法包括二磷酸盐、低能激光、转化生长因子等。然而这些方法不但在操作方法上难以实施,而且花费较高,不易被患者所接受,故难以大规模用于临床。近几年来,传统中医学开始逐步受到重视。作为中华民族的宝贵遗产,古老的传统中医药学不仅受到国内医生和患者的青睐,也在逐步吸引着国际学者的目光。在国内外学者的不断努力下,越来越多的的中医药被开发和应用。以现代分子生物学手段研究古老的中医药学成为当前的热门课题。在本试验中我们选取补肾类中药淫羊藿苷,通过建立大鼠快速扩弓模型,研究补肾类中药淫羊藿苷对大鼠快速扩弓及保持过程中腭中缝骨形成的影响,从而为增强扩弓效果,减少术后复发提供一条新思路。目的:建立大鼠快速扩弓模型,对建立快速扩弓模型的大鼠灌服淫羊藿苷混悬液后观察并分析大鼠腭中缝的组织形态,明确淫羊藿苷对大鼠快速扩弓及保持过程中腭中缝骨形成的影响,为利用传统中药增强快速扩弓效果提供理论依据。方法:36只雄性Wistar大鼠(6周龄,150±10g)被选取后,统一编号并随机分为三组。其中A组被设置为对照组,不进行双眼圈簧扩弓装置的安装。B、C两组大鼠经水合氯醛麻醉以后,以藻酸盐制取口腔印模并用超硬石膏制作模型。以模型为基础,用细丝钳弯制双眼圈簧装置,并调整其力值使其就位后产生100g机械扩张力。再次麻醉大鼠后,把双眼圈簧装置用针持固定于大鼠上颌两侧第一、二磨牙之间的邻间隙内并以光敏树脂固定。7天后各组随机处死4只大鼠,剩余大鼠麻醉后以光固化树脂固定双眼圈簧的弹性加力部位,进入保持期。剩余大鼠于第14天、21天分别处死,制取上颌标本。所有上颌标本取下后立即测量并记录上颌左右两侧第一磨牙中央窝之间的距离。在扩弓及保持过程中,C组大鼠每日灌服20mg/kg的淫羊藿苷混悬液,A、B两组大鼠根据体重给以同等量的溶剂(0.5%羧甲基纤维素钠溶液)。标本脱钙后行HE及免疫组织化学染色观察腭中缝骨组织改建及成骨相关因子的表达状况。结果:1.大鼠上颌快速扩弓以及保持过程中腭中缝组织的形态变化观察HE切片可见,腭中缝中央是由一条狭长的纤维样细胞带构成,富含纤维、成纤维细胞、骨和软骨样前体细胞,细胞呈密集分布,体积较周边细胞小,可以清晰地看到胞核,胞质少。其外侧为软骨细胞层,细胞体积大,呈卵圆形,胞质丰富且染色浅,细胞核大而明显,呈椭圆形。最外侧为两侧硬骨板的边缘,可见骨髓腔。在快速扩弓过程中,大鼠腭中缝被扩宽,腭中缝中央的前体细胞带被撕裂,正常的细胞和纤维的分布位置被打乱。在部分切片中可以观察到炎症反应和新生血管的形成。在两侧硬骨板的边缘可以看到大量的成骨细胞以及新生的骨组织。进入保持期以后仍能看到部分新生血管,但腭中缝的炎症反应减轻,腭中缝中央的纤维样组织和细胞趋于回到原来的正常排列。2.上颌宽度度的变化肉眼观察,B、C两组大鼠腭中缝被扩开,上颌宽度增大。测量数据显示,与A组大鼠相比,B、C两组大鼠在各个时间点上颌宽度均明显增宽(p0.05)。然而,B、C两组之间差异无显著性(p0.05)。3.成骨细胞的数目变化与A组相比,C组大鼠成骨细胞的数目在各个时间点均明显升高,其差异具有显著性(p0.05)。与A组相比,B组大鼠的成骨细胞数目在各个时间点均升高,然而,仅在第7天时其差异具有显著性(p0.05)。4.BMP-2的表达情况与A组相比,B、C两组BMP-2的表达量在第7天和第14天时明显升高,其差异具有显著性(P0.05),且C组大鼠的表达量与B组相比明显升高(p0.05)。然而,统计学分析显示A、B、C三组之间BMP-2的表达量在第21天时无明显差异(p0.05)。5.BMP-4的表达情况与A组相比,B、C两组BMP-4的表达量在第7、14、21天均显著上升,差异有统计学意义(p0.05)。C组BMP-4的表达量在各个监测点均明显高于B组,差异有统计学意义(p0.05)。结论:1.在大鼠上颌快速扩弓及保持过程中,机械刺激可以激发大鼠腭中缝BMP-2及BMP-4的表达,随保持期的延长这种作用逐渐减弱并消失。2.在机械扩张力的作用下,淫羊藿苷可以促进大鼠腭中缝的成骨分化以及BMP-2、BMP-4 的表达。3.淫羊藿苷能够促进上颌快速扩弓及保持过程中腭中缝的骨质改建,加速新骨的形成,有利于扩弓效果的维持,降低术后复发,缩短保持时间。
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【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R783.5

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