应用两种激光显微切割系统获取小鼠牙胚特异组织的比较与体会
本文选题:激光显微切割技术 切入点:牙胚发育 出处:《实用口腔医学杂志》2014年01期
【摘要】:目的:探索2种激光显微切割(laser microdissection)系统应用于切割分离小鼠牙胚特定组织的不同特点。方法:以莱卡LMD6000和蔡司PALM激光显微切割系统分别获取CD1小鼠胚胎期17 d和出生后2 d的下颌第一磨牙牙囊和牙乳头组织。以Trizol法提取2套切割系统获取组织中总RNA,再以RT-PCR法检测两者中管家基因GAPDH表达量的差异。结果:应用莱卡LMD系统获得小鼠下颌第一磨牙牙胚组织中GAPDH基因表达量显著高于以蔡司的PALM系统获得组织中相同基因表达量。莱卡LMD6000激光显微切割系统操作界面友好,切割组织迅速。结论:莱卡LMD6000更适合于下游芯片实验对提取组织RNA完整度较高的要求。
[Abstract]:Objective: to explore the different characteristics of two laser microdissecting systems used to separate the specific tissues of mouse tooth germ.Methods: the follicles and papillae of the first mandibular molars were obtained from CD1 mice on the 17th day of embryo and 2 days after birth by laser microdissection system of Lecca LMD6000 and Zeiss PALM, respectively.Two sets of cutting systems were used to extract total RNAs from tissues by Trizol method, and then the difference of GAPDH expression of housekeeping gene between them was detected by RT-PCR method.Results: the expression of GAPDH gene in mouse mandibular first molar tooth germ tissue obtained by Leica LMD system was significantly higher than that by Zeiss PALM system.Leica LMD6000 laser microcutting system has friendly operating interface and quick cutting structure.Conclusion: Lecca LMD6000 is more suitable for downstream microarray experiments to extract tissue RNA with higher integrity.
【作者单位】: 解放军第306医院口腔科;天津大港油田总医院口腔科;韩国延世大学口腔医学院;首都医科大学口腔医学院;
【基金】:全军十一五课题重点项目(编号:06MA004)
【分类号】:R780.2
【参考文献】
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【共引文献】
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【二级参考文献】
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