糖尿病对小鼠牙齿伸长运动的影响

发布时间：2018-06-08 13:57

  本文选题：糖尿病 + 牙齿伸长运动　； 参考：《山西医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:建立糖尿病小鼠伸长运动实验模型,研究糖尿病小鼠牙齿垂直向伸长过程中Ⅰ型胶原蛋白和富含酸性半胱氨酸的分泌蛋白(SPARC)的表达,探究小鼠牙齿伸长运动的机制以及糖尿病对其的影响,为临床上修复牙列缺损提供理论基础。方法:60只雄性8周龄C57BL/6J小鼠,体重在19-25g左右。小鼠随机分为两组,即对照组(正常组)与实验组(糖尿病组),每组30只;每组再随机分为5个亚组即0天、3天、6天、9天、12天组,每组各6只。实验组小鼠连续5天给予腹腔分次注射70mg/kg1%的链脲佐菌素(STZ),对照组注射同等剂量的柠檬酸缓冲液。注射后72小时后剪尾取血测量血糖,每周测量一次空腹血糖和体重,连续4周,空腹血糖值≥11.1mmol/L为建模成功,建模成功后进行实验。各组小鼠在3%水合氯醛全麻下行右侧上颌后牙拔除术,压迫止血拔牙部位。将两组小鼠分别在0天、3天、6天、9天、12天处死,提取下颌骨。标本在4%多聚甲醛溶液中固定24-48小时,10%EDTA脱钙液脱钙40-50天,常规脱水、浸蜡、包埋,切片,HE染色,观察拔牙后下颌牙齿伸长运动过程中牙周围组织细胞的变化;免疫组化染色,观察实验组与对照组在SPARC与Ⅰ型胶原蛋白的表达差异,运用免疫组化图像进行结果分析,测量表达面积与表达强度,计算平均灰度值与平均光密度(OD),用SPSS19.0统计学方法进行数据处理。结果:形态学:镜下与X线片显示12天后两组小鼠下颌磨牙向伸长,实验组伸长量小于对照组(P0.05);体重变化:实验组与对照组体重3-6天下降(P0.05),实验组体重下降程度大于对照组;9天两组体重逐渐回升(P0.05),12天时接近初始体重,实验组速度慢于对照组。HE染色:1.牙周膜宽度:实验组与对照组左右两侧第一磨牙根中1/3牙周膜宽度平均值无明显变化(P0.05);2.破骨细胞计数:实验组骨基质染色不均,骨线不整齐,骨质疏松,0天至12天细胞随时间呈增长趋势(P0.05);对照组0天时未见明显破骨细胞,3-12天破骨细胞逐渐增多,12天时最多(P0.05),仅12天时实验组小于对照组,差异有统计学意义(P0.05),其他各时间组均无统计学差异(P0.05)。SPARC与Ⅰ型胶原蛋白免疫组化:随着时间增加,平均灰度值逐渐降低,阳性表达逐渐增强,SPARC的平均灰度值与Ⅰ型胶原蛋白在不同时间点上,差异有统计学意义(P0.05)。SPARC在0天、3天、6天、9天、12天时,实验组显著低于对照组,实验组表达强于对照组(P0.05);Ⅰ胶原蛋白除第6天外,其他各组实验组显著高于对照组,实验组表达低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。SPARC和Ⅰ型胶原蛋白的OD值随着时间的增加不断增大,差异有统计学意义(P0.05)。实验组Ⅰ型胶原蛋白OD值低于对照组,SPARC的OD值显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1.对照组与实验组小鼠拔除上颌牙后,对颌牙均有伸长现象,且糖尿病小鼠骨质疏松倾向伸长量小于正常组。2.SPARC与Ⅰ型胶原蛋白在小鼠牙齿伸长运动过程中牙周组织中表达增强,提示可能与牙齿伸长运动有重要联系。3.糖尿病小鼠骨改建能力减弱,牙齿伸长运动过程中破骨细胞活动受限制,Ⅰ型胶原代谢能力下降。
[Abstract]:Objective : To establish an experimental model of elongation exercise of diabetic mice , to study the expression of collagen type 鈪，

本文编号：1996024