FGF8辅助牙源性上皮诱导hDPSCs分化为成牙本质细胞及牙髓细胞

发布时间：2018-06-27 03:03

  本文选题：成纤维细胞生长因子 + 成人牙髓干细胞　； 参考：《中国病理生理杂志》2017年04期

【摘要】：目的:研究成纤维细胞生长因子8(FGF8)对成人牙髓干细胞(hDPSCs)定向分化为成牙本质细胞及牙髓组织的影响。方法:首先分离、克隆培养hDPSCs,通过流式细胞术检测细胞表面标志物鉴定hDPSCs;矿化液中添加50μg/L的FGF8诱导hDPSCs分化,通过real-time PCR检测分化后的细胞中牙本质涎磷蛋白(DSPP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)和核心结合因子α1(Cbfa-1)在mRNA水平的表达;E11.5小鼠牙源性上皮联合FGF8与hDPSCs细胞团重组,再将组织块种植于裸鼠肾囊膜下培养,通过DNA原位杂交鉴定成牙本质细胞及牙髓细胞的来源。结果:成功分离培养hDPSCs,其表面标志物CD29和CD90呈阳性表达;经FGF8诱导的hDPSCs形成较明显的矿化结节,并且牙本质特异性蛋白DSPP、BSP及Cbfa-1表达量上调;E11.5小鼠牙源性上皮联合FGF8可以诱导hDPSCs分化为成牙本质细胞及牙髓细胞。结论:FGF8能够辅助牙源性上皮定向诱导hDPSCs分化为成牙本质细胞及牙髓细胞,并形成牙本质及牙髓腔结构。
[Abstract]:Aim: to study the effect of fibroblast growth factor 8 (FGF8) on the differentiation of adult dental pulp stem cells (hDPSCs) into odontoblast and pulp tissue. Methods: firstly, hDPSCswere isolated, cloned and cultured, hDPSCswere identified by flow cytometry, 50 渭 g / L FGF8 was added to mineralized solution to induce the differentiation of hDPSCs. The expression of dentin sialophosphate protein (DSPP), alkaline phosphatase (ALP), bone sialoprotein (BSP) and core binding factor 伪 1 (Cbfa-1) in differentiated E11.5 mouse odontogenic epithelium combined with recombination of FGF8 and hDPSCs were detected by real-time. The tissue blocks were cultured under the capsule of kidney capsule of nude mice, and the origin of odontoblast and dental pulp cells were identified by DNA in situ hybridization. Results: the positive expression of CD29 and CD90 on the surface markers of hDPSCswas observed, and the mineralized nodules of hDPSCs induced by FGF8 were observed. In addition, the expression of DSPP- BSP and Cbfa-1 up-regulated the odontogenic epithelium of E11.5 mice combined with FGF8, which could induce the differentiation of hDPSCs into odontoblast and dental pulp cells. Conclusion: FGF8 can assist odontogenic epithelium to induce the differentiation of hDPSCs into odontoblast and dental pulp cells, and form dentin and dental pulp cavity structure.
【作者单位】： 潍坊医学院生物科学与技术学院;潍坊市中医院脑病康复科;潍坊医学院口腔教研室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81441107) 山东省自然科学基金资助项目(No.ZR2013HQ019) 山东省高等学校科技计划项目(No.J15LK09) 潍坊医学院大学生科技创新项目(No.KX2016002)
【分类号】：R781

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2072417