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牵张应力对人牙周膜成纤维细胞细胞外金属基质蛋白酶诱导剂表达的影响及相关信号通路的研究

发布时间:2018-10-23 10:53
【摘要】:目的研究人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)在循环牵张力下细胞外金属基质蛋白酶诱导剂(EMMPRIN)(CD147/basgin)的表达变化以及对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,推测EMMPRIN在应力作用下牙周组织改建过程中的可能作用。方法采用荧光免疫组织化学法检测EMMPRIN和VEGF在PDLFs中的表达定位;使用Flexcell System对PDLFs加载6%、12%、20%的循环牵张力0.5、2、6、12、24、36、48及72 h后,采用实时PCR和Western blotting的方法分别观察PDLFs内EMMPRIN及VEGF的基因及蛋白的表达变化;在PDLFs培养液中加入外源性EMMPRIN蛋白6、12、24 h后,分别观察PDLFs内VEGF的基因及蛋白的表达变化。结果 EMMPRIN蛋白主要表达于PDLFs的细胞膜和细胞质,而VEGF则在PDLFs的细胞核和细胞质中有较强表达。对PDLFs分别施加6%、12%及20%的机械牵张力后,细胞内EMMPRIN与VEGF的基因和蛋白表达均特异性上调;外源性的EMMPRIN蛋白可以促进PDLFs中VEGF mRNA的表达。结论机械牵张力可特异性上调PDLFs中EMMPRIN和VEGF的表达;EMMPRIN可能调控VEGF的表达并与之共同参与应力作用下的牙周组织改建的过程。
[Abstract]:Objective to study the expression of extracellular matrix proteinase (EMMPRIN) (CD147/basgin) and the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in human periodontal ligament fibroblasts (PDLFs) under cyclic tension. The possible role of EMMPRIN in the process of periodontal tissue remodeling under stress was inferred. Methods the expression localization of EMMPRIN and VEGF in PDLFs was detected by fluorescence immunohistochemical method, and the cyclic tension of PDLFs loaded with Flexcell System was 0.5% and 20%. The expression of EMMPRIN and VEGF genes and proteins in PDLFs were observed by real-time PCR and Western blotting, and the expression of VEGF genes and proteins in PDLFs were observed after the addition of exogenous EMMPRIN protein 612C 24 h into PDLFs medium. Results EMMPRIN protein was mainly expressed in the cell membrane and cytoplasm of PDLFs, while VEGF was strongly expressed in the nucleus and cytoplasm of PDLFs. The gene and protein expression of EMMPRIN and VEGF in PDLFs were up-regulated by mechanical tension of 12% and 20%, respectively. Exogenous EMMPRIN protein could promote the expression of VEGF mRNA in PDLFs. Conclusion Mechanical tension can specifically up-regulate the expression of EMMPRIN and VEGF in PDLFs and EMMPRIN may regulate the expression of VEGF and participate in the process of periodontal tissue remodeling under stress.
【作者单位】: 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔修复科上海口腔医学重点实验室;
【分类号】:R78

【共引文献】

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