牵张应变对人牙周膜细胞中NLRP3炎症体通路相关因子表达的影响

发布时间：2018-12-12 02:39

【摘要】：目的研究牵张应变对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)表达炎症体通路相关因子的影响。方法对体外培养的HPDLCs施加20%牵张应变6、24 h,分别采用实时定量PCR以及免疫印迹技术检测NLRP3、Caspase-1及IL-1β的mRNA及蛋白表达的变化。对体外培养的HPDLCs施加20%牵张应变1、2、4、6 h后,采用酶联免疫吸附实验检测细胞分泌的IL-1β蛋白变化。对照组HPDLCs培养于弹性培养皿中,与动态牵张应变加载组的培养条件一致,但不加载应变。结果 6 h牵张应变作用下HPDLCs中NLRP3、caspase-1及IL-1β的mRNA及蛋白表达较对照组增加(P0.05);24 h牵张应变作用下HPDLCs中NLRP3的蛋白表达水平上调(P0.05);加载牵张应变4、6 h后,细胞培养上清中IL-1β含量随牵张时间的增长而增加(P0.05)。结论20%机械牵张6 h能诱导HPDLCs中NLRP3/Caspase-1炎症体-IL-1β通路因子的表达。
[Abstract]:Objective to study the effect of stretch strain on the expression of inflammatory pathway related factors in human periodontal ligament cells (human periodontal ligament cells,HPDLCs). Methods the expression of mRNA and protein of NLRP3,Caspase-1 and IL-1 尾 were detected by real-time quantitative PCR and Western blotting. The changes of IL-1 尾 protein secreted by HPDLCs were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) for 6 h after the strain of 20% stretch strain was applied to the cells. The HPDLCs of control group was cultured in elastic petri dish, which was consistent with the culture condition of dynamic strain loading group, but no strain was applied. Results the expression of mRNA and protein of NLRP3,caspase-1 and IL-1 尾 in HPDLCs at 6 h was higher than that in control group (P0.05), and the expression of NLRP3 protein in HPDLCs was up-regulated under 24 h stretch strain (P0.05). The content of IL-1 尾 in the supernatant of cell culture increased with the increase of stretch time (P0.05). Conclusion 20% mechanical stretch for 6 h can induce the expression of IL-1 尾 pathway factor in NLRP3/Caspase-1 inflammatory body in HPDLCs.
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔修复科;上海市口腔医学研究所上海市口腔医学重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31470903,31270991,30900282) 上海市浦江人才计划资助项目(13PJD021) 上海市青年科技启明星计划(A类)项目(10QA1404200) 上海市重点学科建设项目(T0202,S30206-sms02)
【分类号】：R781.4

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本文编号：2373741