上颌骨经缝牵引组织再生的基础研究

发布时间：2020-03-21 00:29

【摘要】： 上颌面中部发育不足是口腔颌面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决上述问题,本研究以生长期犬为动物模型,采用微型镍钛合金牵引器,经腭横缝和额上颌缝牵引,试图了解不同牵引力作用下缝组织再生情况。第一部分幼犬上颌骨经缝牵引的组织学研究目的为探索一种新的上颌牵引方法的可行性及组织学改变,本研究拟采用内置式微型镍钛合金牵引器,对幼犬腭横缝及额上颌缝行持续牵引来扩张腭横缝,前移上颌骨复合体,以组织学各方面指标来探讨不同牵引力对腭横缝组织影响。方法以3～4月龄健康杂种犬24只为实验动物,随机分为4组,实验组分A、B、C组,每组6只,空白对照组6只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A组)、1200g(B组)、1500g(C组)。术后定期拍摄X片,以观察上颌骨牵引位移情况。于牵引5、10、15、20、30、40天过量麻药肌注处死各组动物中一只,切取腭横缝组织,行HE、甲苯胺蓝及天狼猩红染色,Olympus显微镜及暗视野偏振光显微镜下对其进行组织学观察。结果实验组上颌骨被成功前徙,以C组最明显。3种牵引力组织学表现无明显差异,初期腭横缝逐渐增宽,骨突起拉长,成骨细胞数量增多,呈多层排列,成纤维细胞增生活跃,胶原纤维排列紊乱,组织间有少量血细胞渗出。后期骨缝接近正常宽度,胶原纤维排列整齐。天狼猩红染色见牵引期内Ⅰ型胶原增多明显,Ⅱ、Ⅲ型胶原逐渐减少。甲苯胺蓝染色未见有软骨细胞及软骨细胞团出现。结论对于上颌发育不足畸形,缝牵引是一种可行的治疗方法。在1500g力范围内牵引力越大,骨缝扩张越快,上颌骨前移越明显。牵引期缝组织内有新骨组织形成。第二部分幼犬腭横缝牵引的超微结构观察目的了解不同牵引力对幼犬腭横缝组织内各种超微结构影响。方法以3～4月龄健康杂种犬12只为实验动物,随机分为4组,实验组分A、B、C组,每组3只,空白对照组3只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式微型镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A组)、1200g(B组)、1500g(C组)。于牵引10、20、40天处死各组动物一只,取一块腭横缝组织,修整成1mm~3,常规制作透射电镜标本,行超微结构观察。结果实验各组镜下表现未见有明显区别,牵引初期缝组织出现断裂间隙,胶原纤维排列松散,后期见大量增生活跃的成骨细胞,内含扩张粗面内质网,网腔内充满低电子密度絮状物,胶原纤维排列紧密、整齐。40天可见新生骨基质。结论在牵引力作用下,初期骨缝组织出现轻微损伤性改变,继而表现出新骨纽织再生过程。镜下未见软骨细胞。第三部分幼犬腭缝牵引单位骨量碱性磷酸酶变化研究目的检测3种牵引力对幼犬腭横缝区骨碱性磷酸酶影响,定量分析成骨细胞活性。方法动物分组及手术植入牵引器同第一部分,分别于牵引5、10、15、20、30、40天切取一侧腭横缝组织,剔除软组织后匀桨,4000rpm,4℃离心,分光光度仪半定量分析腭横缝组织中碱性磷酸酶含量。结果各实验组碱性磷酸酶含量增高明显,A组:14.01±4.84 U/gprot;B组:14.2±4.78U/gprot;C组:15.63±10.22U/gprot;空白对照组:7.47±0.09U/gprot。统计分析显示差异有显著性(p＜0.01)。结论牵引力可有效提高碱性磷酸酶含量,增强成骨细胞活性。其中以C组最为显著,但牵引后期碱性磷酸酶含量下降幅度也最大。我们推测既可有效扩张腭横缝又不损伤周围组织的较佳作用力是1200g力。第四部分幼犬腭横缝牵引BNP-2、-4、-7的表达目的了解缝牵引成骨中不同牵引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7的表达。方法标本取用第一部分的石蜡切片标本,采用SABC法作免疫组织化学研究,Olympus显微镜观察摄片,Image-pro plus软件测量单位面积阳性染色细胞累积光密度值(IOD)。结果骨形成蛋白-2、-4、-7阳性染色呈棕黄色,分布在细胞胞浆内,主要定位于缝两侧骨基质边缘的成骨细胞、间充质细胞、成纤维细胞、埋入新骨基质中的骨细胞。牵引初期骨形成蛋白-2、-4表达水平增强,以C组最明显,B组次之,A组最弱。10天后开始下降,超过15天A、B两组阳性表达再次升高,C组30天后略有回升。牵引期BMP-7呈下降趋势。结论牵引力所造成腭横缝周力学环境发生改变,导致了骨形成蛋白-2、-4表达增高。骨形成蛋白-2、-4表达水平与牵引区的增殖特性相一致。加入外源性生长因子时期最好在保持期,而不是牵引期。
【图文】：

对照组,红黄,猩红,I型胶原

图13:对照组缝组织天狼猩红染色，缝组织内以绿色m型胶原为主，红黄色的I型及n型胶原较少(X100)Figure13NormalTPSSiriusRed，suturaltissuemainlygreeneolor111tyPecollogen(X100)图14:B组牵引40天天狼猩红，愕横缝内主要是红黄色的I型胶原，11、111型胶原几乎消失(又100)Figure14distraeted40dayTPSinBgrouPSiriusRed，Redandyellloweolor1tyPeeollogenincreased，greeneolor111tyPeand11tyPeeollogennearlydisaPPeared(x100)

猩红,红黄

图13:对照组缝组织天狼猩红染色，缝组织内以绿色m型胶原为主，红黄色的I型及n型胶原较少(X100)Figure13NormalTPSSiriusRed，，suturaltissuemainlygreeneolor111tyPecollogen(X100)图14:B组牵引40天天狼猩红，愕横缝内主要是红黄色的I型胶原，11、111型胶原几乎消失(又100)Figure14distraeted40dayTPSinBgrouPSiriusRed，Redandyellloweolor1tyPeeollogenincreased，greeneolor111tyPeand11tyPeeollogennearlydisaPPeared(x100)
【学位授予单位】：中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R782.2

【参考文献】