IL-8介导的中性粒细胞FOXP3表达的下调促进口腔鳞癌进展

发布时间：2020-04-09 04:31

【摘要】：目的:许多研究已经证实FOXP3(叉状头/翅膀状螺旋转录因子3,forkhead box P3)除了在调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)上有表达之外,在多种肿瘤细胞中也有表达,并且不同肿瘤细胞中的FOXP3对肿瘤的进展起着不同的作用。中性粒细胞作为癌微环境中常见的免疫细胞,在不同癌微环境中,其对肿瘤的进展也起着不同的作用。然而,FOXP3在中性粒细胞上的表达及其功能并未见有相关研究。因此,本研究主要是探讨癌微环境中的中性粒细胞FOXP3的表达对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)进展的影响。方法:1.将SCC-9(人舌鳞癌细胞系)细胞与中性粒细胞在96孔板中共培养并用人重组白细胞介素8(Interleukin-8,IL-8)处理;24小时后,CCK-8(细胞计数试剂盒,Cell Counting Kit 8)法测定SCC-9细胞增殖。2.使用IL-8处理中性粒细胞,12小时后,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-q PCR)分析FOXP3 m RNA在中性粒细胞的表达。3.将SCC-9细胞与中性粒细胞在96孔板中共培养并用P60(FOXP3特异性抑制剂)抑制FOXP3蛋白的作用;24小时后,CCK-8法测定SCC-9细胞增殖。4.收集OSCC癌组织标本,使用免疫荧光组织化学技术检测OSCC癌微环境中的中性粒细胞FOXP3蛋白的表达并分析其与OSCC患者临床分期之间的关系。5.使用免疫荧光组织化学技术检测OSCC组织中IL-8蛋白的表达。结果:1.中性粒细胞、IL-8共同促进SCC-9细胞增殖。2.IL-8下调中性粒细胞FOXP3 m RNA的表达。3.中性粒细胞FOXP3蛋白被抑制后促进SCC-9细胞增殖。4.OSCC癌微环境中的中性粒细胞FOXP3蛋白的表达在临床Ⅳ期组低于临床Ⅱ期组(P=0.001)和临床Ⅲ期组(P=0.008)。5.OSCC癌组织中IL-8蛋白的表达高于癌旁组织。结论:癌微环境中的IL-8可以趋化中性粒细胞,且由IL-8介导的中性粒细胞FOXP3表达的下调可以促进OSCC进展。
【图文】：

细胞增殖,中性粒细胞,对照组,细胞

胞、IL-8 共同促进 SCC-9 细胞增殖环境中同时存在着中性粒细胞和 IL-8[23]。胞、IL-8 对 OSCC 细胞增殖的影响，我们细胞在 96 孔板中共培养，24 小时之后 CCK们的实验结果（如图 2-1）证实，，IL-8、中胞，共同促进 SCC-9 细胞增殖(P < 0.001)。胞共培养 24 小时，与对照组相比差异无统单独作用于 SCC-9 细胞 24 小时，与对照组 0.684）。

中性粒细胞

s. The result confirmed that neutrophils and IL-8 promoted SCent was independently repeated 3 times. Data are mean ± SD中性粒细胞 FOXP3 mRNA 的表达，我们的实验结果证实 IL-8、中性粒细胞 IL-8 是否能够影响中性粒细胞 FOXP3 的变化是否会对 SCC-9 细胞的增殖产生影响们用重组人 IL-8 细胞因子刺激中性粒细胞测中性粒细胞 FOXP3 mRNA 的表达。我们的-8 能够下调中性粒细胞 FOXP3 mRNA 的表达的 0.246 ± 0.093 倍(P = 0.005)。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R739.8

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