大鼠实验性牙移动三叉神经节内甘丙肽表达的研究

发布时间：2020-04-17 11:15

【摘要】： 疼痛是造成患者对正畸治疗产生恐惧的主要原因。研究疼痛产生的机制,寻找减轻疼痛的方法是正畸领域的研究热点之一。本研究的目的是探索正畸牙移动过程中甘丙肽(GAL)在大鼠三叉神经节(TG)内表达变化的规律,探讨正畸牙移动过程中疼痛产生的机理,为进一步研究减轻正畸疼痛的方法奠定理论基础。本实验选择雄性Wistar大鼠35只作为研究对象,建立正畸牙移动动物模型,取大鼠三叉神经节,制作石蜡切片。采用免疫组织化学染色的方法观察大鼠三叉神经节内GAL的表达。实验结果显示正常大鼠三叉神经节细胞中存在GAL免疫阳性的神经节细胞,但细胞个数较少,细胞染色为弱阳性。正畸加力1天后GAL免疫阳性表达开始上升,加力3天后明显增加,在加力5天后GAL免疫阳性表达达到高峰,神经节细胞中GAL免疫阳性染色为强阳性,在加力7天后,出现下降趋势。这一变化趋势与正畸临床中患者疼痛出现与减轻的变化趋势相吻合。说明甘丙肽作为内源性镇痛物质与正畸牙移动导致的牙体与牙周疼痛密切相关,其具体作用机制还有待做进一步的研究。
【图文】：

胸骨,大鼠,肋骨,每日检查

一端用0.20mm的结扎丝固定于两颗切牙处，，拉力用测力计检测为50g（见图1）。用软食饲养动物，并给予充足的清水。每日检查加力装置有无脱落并观察大鼠的身体状况。图2.1 动物模型制作2.3 实验标本的制作2.3.1 取材与固定空白对照组大鼠在喂养7天后经心脏灌流处死。实验组大鼠分别于加力后6小时、12小时、1天、3天、5天、7天处死。实验步骤如下：速眠新麻醉后将动物固定于手术台上，剪开胸部皮与肌肉，暴露胸骨与第3、4 肋骨，沿3、4 肋间剪开，暴露胸腔，用止血钳夹住近心端胸骨，将胸骨与肋骨向上翻起，暴露心脏，将注射器针头插入左心室尖，深约1cm，并同时剪开右心耳，缓慢推注10%生理盐水，直至流出清亮液体，然后灌注4%多聚甲醛，断头。揭开大鼠头盖骨

示意图,头盖骨,大鼠

取大鼠三叉神经节置于4%的多聚甲醛中固定。图2.2 大鼠三叉神经节解剖结构示意图图2.3 大鼠头盖骨图2.4 大鼠大脑图2.5 大鼠三叉神经节的位置图2.6 大鼠三叉神经节2.3.3 脱水、透明、浸蜡、包埋及切片75%酒精，85%酒精，95%酒精，100%酒精对三叉神经节逐级脱水。之后用二甲苯透明。组织透明后立即浸入三种梯度石蜡液中，每缸2个小时，共6个小时。将液态石蜡注入包埋盒中，冷却台上冷却。之后沿三叉神经节长轴做连续切片，每张厚度5μm。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R783.5

【参考文献】