富血小板血浆对不同条件下人牙周膜成纤维细胞功能的影响

发布时间：2020-05-16 08:25

【摘要】：目的：本研究拟讨论富血小板血浆（platelet-rich plasma，PRP）对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts，HPDLFs)增殖和迁移能力以及与人骨髓基质细胞（human bone marrow stroma cells,HBMSCs）共培养下的细胞增殖能力的影响，为PRP在牙周组织再生治疗中的应用提供实验数据。方法： 1.采用组织块培养法体外分离培养人PDLFs，检测波形丝蛋白的表达，以确定其生物学来源；采用全骨髓培养法分离培养人骨髓基质细胞；PRP由江苏省血液中心提供。 2、采用MTT法检测不同浓度PRP（1%,5%,10%,,20%,30%,50%）对PDLF增殖能力的影响；transwell系统测定不同浓度PRP（1%,5%,10%,,20%,30%,50%）对HPDLFs迁移效果，无血清培养液为阴性对照，10%新生小牛血清为阳性对照。 3.将HPDLFs和HBMSCs按1：1接种至transwell系统中，不同浓度PRP（5%,10%,20%,30%,50%）分别加入transwell中，无血清培养液为阴性对照，10%新生小牛血清为阳性对照，另设PDLFs细胞单独培养为共培养的阴性对照，培养7天进行MTT测定。结果： 1.通过组织块法分离培养的HPDLFs表达波形丝蛋白，属于中胚层来源的细胞；通过全骨髓培养法分离培养人骨髓基质细胞呈成纤维细胞样的外观，在体外具有良好的增殖能力。 2. 3d、5d和7d时，各浓度PRP组与阴性对照组比较细胞量均显著增高(P＜0.01)，以20%浓度组最佳(P＜0.01)；各浓度PRP组在7天的培养期内均显示明显的时间依赖性。与阴性对照相比，不同浓度的PRP均能明显促进细胞迁移（P＜0.01），以10%的浓度组PRP效果（91.80±2.39）最佳(P＜0.01）。 3. 7天时，各浓度PRP组的细胞量均显著高于阴性共培养对照组和阴性单独培养对照组(P＜0.01）；并且共培养组比单独培养增殖组增殖能力强(P＜0.01）；以10%PRP浓度组最佳(P＜0.01）。结论：PRP能促进人牙周膜成纤维细胞的迁移和增殖，对与骨髓基质细胞共培养条件下，PRP对人牙周膜成纤维细胞的增殖促进效果最佳。
【图文】：

波形蛋白,细胞,漩涡

图 1 .3 H PD L F 波形蛋白阳性（× 1 0 0 ）图 1 .4 HP D LF 阴性对照（ ×1 0 0 ） Ta b 1 . 3 vi m en t i n is po s it i v e ly ex pr es se d in HP DL F （ × 10 0 ） Ta b 1. 4 v im en t i n is n eg a t i ve l y ex p r es se d in c on t ro l s （× 1 00 ） 2. 3 HB M S Cs 的形态观察在首次换液前，因培养液中有大量红细胞，无法观察细胞生长情况。首次换液并经 PB S 清洗后可见贴壁细胞，散在分布，，细胞体积较大，形态似成纤维样，随着培养时间的延长，细胞呈团簇样生长，可见多个集落形成，排列成漩涡状、放射状 ( 见图 1. 5 , 1. 6 ) 。 7- 1 4 d 细胞集落间相互融合成单层。

细胞,漩涡,阴性

图 1 .3 H PD L F 波形蛋白阳性（× 1 0 0 ）图 1 .4 HP D LF 阴性对照（ ×1 0 0 ） Ta b 1 . 3 vi m en t i n is po s it i v e ly ex pr es se d in HP DL F （ × 10 0 ） Ta b 1. 4 v im en t i n is n eg a t i ve l y ex p r es se d in c on t ro l s （× 1 00 ） 2. 3 HB M S Cs 的形态观察在首次换液前，因培养液中有大量红细胞，无法观察细胞生长情况。首次换液并经 PB S 清洗后可见贴壁细胞，散在分布，细胞体积较大，形态似成纤维样，随着培养时间的延长，细胞呈团簇样生长，可见多个集落形成，排列成漩涡状、放射状 ( 见图 1. 5 , 1. 6 ) 。 7- 1 4 d 细胞集落间相互融合成单层。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R780.2

【参考文献】