去卵巢大鼠下颌下腺AQP-5的表达变化及机制研究

发布时间：2020-05-20 20:13

【摘要】：目的:观察低雌激素状态对下颌下腺腺泡细胞中AQP-5表达分布的影响,探讨雌激素经SOCE通路以及TRPV1通路参与调控AQP-5表达分布的可能机制。方法:本研究采用成体SD雌性大鼠90只,随机分为SHAM组,OVX组和OVX+E组,每组30只。大鼠去卵巢手术后恢复2周,β-雌二醇治疗4周后,利用放射免疫法检测大鼠血清雌二醇含量的变化,利用免疫组化和免疫荧光方法观察AQP-5,STIM1,Orai1,M1,M3,NOS-1和TRPV1在颌下腺的变化情况,免疫印迹方法观察STIM1和Orai1在蛋白水平表达量的改变,钙成像技术观察下颌下腺腺泡细胞内钙离子的改变,乙酰胆碱酯酶染色法观察下颌下腺乙酰胆碱酯酶的变化情况。结果:大鼠去卵巢后,血清雌二醇含量明显下降。免疫组化和免疫荧光结果显示,AQP-5主要表达在下颌下腺腺泡细胞的顶膜和侧膜,去卵巢后大鼠下颌下腺腺泡细胞AQP-5总表达量无显著改变,但顶膜AQP-5表达显著减少,侧膜明显增加,胞浆内无显著变化,雌激素干预后较OVX组相比,顶膜AQP-5表达增多,侧膜表达减少,接近SHAM组水平。NOS-1,TRPV1,M1和M3主要表达在下颌下腺腺泡细胞和导管细胞,大鼠去卵巢后,表达较SHAM组均显著降低,给予雌二醇干预后恢复到SHAM组水平。免疫荧光双标和免疫印迹结果显示,STIM1和Orai1在下颌下腺腺泡细胞可以共定位,且OVX组STIM1和Orai1表达减少,雌激素干预后表达增多,接近SHAM组水平。钙成像技术显示,OVX组大鼠下颌下腺腺泡细胞中钙离子浓度显著下降,雌激素治疗后得到改善,接近SHAM组水平。乙酰胆碱酯酶染色结果显示,大鼠去卵巢后下颌下腺AchE表达较SHAM组显著增加,雌激素干预后无显著改善。结论:上述结果提示,STIM1-Orai1通路和TRPV1通路均可能通过调控AQP-5引发围绝经期下颌下腺唾液分泌障碍。
【图文】：

图 2.1.1 大鼠动情期和非动情期阴道细胞学表现动情期细胞较大，呈多边形，细胞质丰富，，非动情期细胞小而圆。标尺：30μm。2.2 大鼠血清雌二醇含量OVX 组血清雌二醇含量较 SHAM 组显著降低（6.958±3.236 pg/ml vs 14.642±4.213 pg/ml, P<0.01），OVX+E 组与 OVX 组相比含量增加（13.858±5.138 pg/ml vs6.958±3.236 pg/ml, P<0.01），但较 SHAM 组无显著差异（13.858±5.138 pg/ml vs14.642±4.213 pg/ml, P>0.05）（图 2.2.1）。

图 2.1.1 大鼠动情期和非动情期阴道细胞学表现较大，呈多边形，细胞质丰富，非动情期细胞小而圆。标尺：3雌二醇含量雌二醇含量较 SHAM 组显著降低（6.958±3.236 pg/m.01），OVX+E 组与 OVX 组相比含量增加（13.858±5/ml, P<0.01），但较 SHAM 组无显著差异（13.858±5/ml, P>0.05）（图 2.2.1）。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R781

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本文编号：2673138